На головну

 ОДНЕ З ПЕРСПЕКТИВНИХ використання стовбурових клітин В МЕДИЦИНІ |  Заняття № 9 |  Контроль вихідного рівня знань (тестування). |  Стовбурові клітини кісткового мозку |  Зберігання стовбурових клітин |  Захворювання і показання для застосування стовбурових клітин |  Лікування стовбуровими клітинами |  Заняття № 10 |  Контроль вихідного рівня знань (тестування). |  культивування клітин |

Лінії клітин людини

  1.  Figure 3.21. У разі прориву лінії тренду початкова позиція повинна бути закрита і перегорнута.
  2.  I. Культури клітин
  3.  I. Органічна будова привертає людини до здатності розуму
  4.  I. Оцінка клітин-продуцентів.
  5.  I. Порівняння органічної будови рослин і тварин у зв'язку з будовою людини
  6.  II. Уява людини всюди кліматично і органічно визначено, і повсюдно традиція керує уявою
  7.  III. Про рганіческое будова привертає людини до тонким почуттям, мистецтва і мови

Як тільки стовбурова клітина починає ділитися, їх кількість зростає в контрольованій штучному середовищі (культурі), цю «колекцію» здорових, діляться і недиференційованих стовбурових клітин можна називати клітинної лінією. Стовбурові клітини можна стимулювати і змусити їх диференціюватися в необхідний тип клітин, цей процес називається контрольована спрямована диференціювання. При цьому ембріональні стовбурові клітини показують здатність до більшої кількості типів клітин в порівнянні з дорослими стовбуровими клітинами.

Культивування людських клітин дещо суперечить правилам біоетики, оскільки ізольовано вирощувані клітини можуть пережити батьківський організм, а потім використовуватися для проведення експериментів або для розробки нових методів лікування і вилучення з цього прибутку. Перше судове рішення в даній області було винесено у Верховному суді штату Каліфорнія у справі «Джон Мур проти представників Каліфорнійського університету», згідно з яким пацієнти не мають ніяких прав власності на лінії клітин, отриманих з органів, видалених з їх згоди.

2.1.1. Методи зберігання ЕСК (бластоцист).

У клініках ЕКО використовується дві технології кріоконсервації. Технологія, яка називається "повільним заморожуванням", і вітрифікація.

- "Повільне заморожування". Цю процедуру здійснюють таким чином: ембріон переносять із пробірки з живильним розчином в середу з кріопротекторами, і витримують близько 10 хв.

Кріопротектори - це речовини, що захищають клітини від переморажіванія, освіти кристалів льоду і пошкодження клітини. При повільному заморожуванні кріопротекторами служать пропіленгліколь і сахароза (попросту - тростинний цукор). Пропіленгліколь захищає клітини ембріона зсередини, а сахароза - зовні.

Ембріони з кріопротекторними середовищем засмоктують в пластикові соломинки,на зразок тих, що подають до коктейлів,тільки коротше і тонший, і зроблені вони з нетоксичного пластику. Крім того, у кріосоломінок є «пробочка» для запечатування. На соломинку з ембріоном пишуть незмивним маркером прізвище пацієнтки, номер її карти, дату заморожування і порядковий номер соломинки. Так що переплутати їх при розморожуванні неможливо.

Далі соломинку з ембріоном починають повільно охолоджувати. Охолоджувати соломинку потрібно дуже повільно, з постійною швидкістю - півградуса за хвилину. Для створення таких строгих умов використовують спеціальні апарати - "програмовані заморажівателі".

Коли температура знизиться до 7 градусів морозу, до соломинки доторкаються охолодженим в рідкому азоті пінцетом - і вміст соломинки замерзає. Кристалики необхідні, щоб викликати процес виморожування води з клітин ембріона - приблизно так, як на морозі висихає білизна. Далі продовжують повільно охолоджувати соломинку до мінус 35 градусів, а потім швидким рухом переносять її в рідкий азот, в якому і зберігають остаточно при температурі 196 градусів морозу.

Слабкі сторони методу повільного заморожування, в тому, що захист ембріонів від льоду в технології повільного заморожування побудована на виморожування води, що приводить до зневоднення клітин.

Виморожування води для ембріонів - "палиця з двома кінцями". З одного боку, зневоднення ембріонів допомагає їм пережити заморожування. Але з іншого боку, зневоднення само по собі часто виявляється згубним. Адже йдеться про дуже сильному зневодненні, при повільному заморожуванні клітка втрачає до 85-90% води. При таких втратах із клітки йде не тільки вся так звана "вільна вода", але частково і "зв'язана вода", що входить до складу білків. А це призводить до руйнування білкових молекул і, в кінцевому підсумку, до руйнування самої клітини.

Це небезпечно для ембріонів, не дуже ефективно. Для здійснення цього методу необхідна дорога апаратура, невиправдано великі витрати тонкого ручної праці.

Апаратів для повільного заморожування не може кращих. Це рівнозначно тому. Що не може бути кращих друкарських машинок або гасових ламп. Серед них, безумовно, є кращі, але для сучасної медицини це не має ніякого значення.

- Технологія вітрифікації.При вітрифікації захист ембріонів заснована на іншому підході - тут не допускається утворення кристалів льоду взагалі. Вся рідина - як в кріосоломінке, так і в клітинах ембріона - при охолодженні до температури рідкого азоту переходить у склоподібний стан, не утворюючи кристали. Для цього використовують інші, більш складні кріопротекторними середовища, ніж при повільному заморожуванні. Ембріони перебувають в кріопротекторними середовищі всього одну-дві хвилини, а потім набирають в кріосоломінку і занурюють в рідкий азот.

Метод вітрифікації набагато безпечніший для ембріонів, ніж повільне заморожування. За найостаннішими даними, при вітрифікації гинуть і ушкоджуються не більше 10-12% ембріонів. Решта ембріони розморожуються без втрат. У той же час, при застосуванні повільного заморожування загибель ембріонів становить 25-65%.

Термін зберіганнязаморожених ембріонів, Якщо умови зберігання стабільні, не обмежений. Але поки відомий випадок настання вагітності після переносу ембріонів, що зберігалися в рідкому азоті 12 років.

Кріо-сховище являє собою приміщення з судинами Дьюара - щось на зразок гігантського металевого термоса, заповненого рідким азотом. У ньому є спеціальні осередки, в яких знаходяться соломинки із замороженими ембріонами.

заморожування ембріонів здійснюється для того щоб зберегти надлишкові, але гарні ембріони, не використані в програмі ЕКЗ. У деяких клініках їх запросто називають "зайвими" ембріонами, але мені таке слово не подобається. Вони не зайві, вони саме надлишкові на даний момент. Адже в програмі ЕКЗ не переносять пацієнтці більше двох ембріонів, а інші хороші ембріони заморожують. Якщо вагітність не настане, що залишилися ембріони можна розморозити і перенести пацієнтці в іншому циклі.

У нашій країні, наприклад, відповідно до міжнародних норм і наказом МОЗ РФ (№ 301 від 28.12.1993 року) "зайві" бластоцисти повинні зберігатися деякий час в замороженому вигляді, але потім неодмінно знищуватися. Лише в шести країнах прийняті закони, що дозволяють їх використання в дослідницьких цілях: США, Великобританія, Фінляндія, Греція, Голландія і Швеція. У п'яти країнах повністю заборонено використання бластоцист: в Австрії, Данії, Франції, Ірландії та Іспанії. У більшості інших європейських країн, зокрема в Італії та Португалії, а також в Росії, з цього питання немає законодавств. У Німеччині дозволений ввіз ембріональних стовбурових клітин.

З огляду на пластичності і потенційно необмеженого потенціалу самовідновлення, ембріональні стовбурові клітини мають перспективи застосування в регенеративної медицини і заміщення пошкоджених тканин. Однак у даний момент не існує ніякого медичного застосування ембріональних стовбурових клітин.

2.2.2. Пуповинна кров. Плацентарно-пуповинна кров, зібрана після народження дитини, дуже багата стовбуровими клітинами. Взявши цю кров і помістивши в криобанк стовбурових клітин, в подальшому можна використовувати її для відновлення практично будь-яких тканин і органів, а також для лікування будь-яких захворювань, в тому числі й онкологічних. Однак існує думка, що кількість стовбурових клітин в пуповинній крові не дуже багато, і ефективне їх застосування можливе лише одноразово для самої дитини до 10 років.

Сьогодні в основному в банках стовбурових клітин зберігаються клітини, виділені з пуповинної крові, зібраної при народженні дитини.

При використанні плодів, особливо при пізніх абортах, для отримання ембріональних стовбурових або прогеніторних клітин слід отримати інформовану згоду жінки на використання абортивного матеріалу і схвалення програми дослідження комітетом з біоетики. Етичними правилами особливо підкреслюється необхідність не допускати комерціалізації таких досліджень. Це необхідно, перш за все, для того, щоб уникнути психологічного тиску на матір (за допомогою грошового підкупу чи шляхом удаваної оцінки стану її плоду) при отриманні її згоди на переривання вагітності.

РСК

Виділення і збереження стовбурових клітин може розглядатися як форма біологічного страхування, оскільки з віком кількість стовбурових клітин в організмі зменшується, а саме вони, на думку, вчених, зможуть в майбутньому стати панацеєю від багатьох хвороб.

Отриманий кістковий мозок обробляють, щоб видалити кров і фрагменти кістки. В отриманий кістковий мозок можуть додавати консервант або заморожувати його, щоб зберегти стовбурові клітини до тих пір, поки вони знадобляться. Ця процедура відома як кріоконсервування. Стовбурові клітини можуть бути заморожені протягом багатьох років.



 Трансфекція і трансдукція |  заняття №11
© um.co.ua - учбові матеріали та реферати