Головна

Ізолювання барбітуратів водою, підкисленою щавлевою кислотою.

  1. IV. Сіль освічена слабким підставою і слабкої кислотою.
  2. Ізолювання алкалоїдів підкисленою водою (метод А. А. Васильєвої).
  3. Кількісне визначення барбітуратів
  4. Методи виявлення барбітуратів хімічними методами
  5. Виявлення барбітуратів методом хроматографії в тонкому шарі сорбенту
  6. Робота 1. Встановлення нормальності і титру KMnO4 по 0,05 н розчину щавлевої кислоти.

Оптимальні умови ізолювання барбітуратів з біологічного матеріалу водою, підкисленою щавлевою кислотою, і спосіб очищення отриманих витяжок розробила М. Д. Швайкова з співробітниками. Відповідно до цього методу, в конічну колбу або стакан вносять 100 г ретельно подрібнених органів трупів, додають 200 мл води, підкисляють насиченим водним розчином щавлевої кислоти до рН = 2 (всесвітній індикатору) і залишають на 2 год при частому перемішуванні. Потім вміст колби переносять в стакан для центрифугування місткістю 500 мл і центрифугують протягом

30 хв (3000 об / хв). Центрифугат зливають з осаду і проціджують через ватний тампон. Проціджений рідина збирають в ділильну воронку і перевіряють рН цієї рідини. У разі необхідності рідина доводять до рН = 2. Вміст ділильної лійки збовтують з трьома порціями хлороформу (по 20, 15 і 15 мл) протягом 5 хв. Якщо утворюється емульсія, то її руйнують центрифугуванням.

Хлороформні витяжки з'єднують, доводять хлороформом до 50 мл і переносять в ділильну воронку, в яку додають 25 мл 0,1 н. розчину гідроксиду натрію, і збовтують. Водну фазу відокремлюють від хлороформно витяжки. Цю витяжку збовтують з двома порціями води по 1,5 мл. Першу і другу порції води (по 1,5 мл), якими промивали хлороформні витяжки, приєднують до лужної водної фазі. Потім водну фазу підкислюють соляної кислотою до рН = 2, вносять в ділильну воронку і збовтують з двома новими порціями хлороформу (по 20 мл) протягом 5 хв. Хлороформні витяжки з'єднують і доводять хлороформом до 50 мл. У цих витяжках визначають наявність і кількісний вміст барбітуратів.

2. Ізоляція барбітуратів водою, підкисленою сірчаною кислотою.

Метод виділення барбітуратів з біологічного матеріалу, заснований на ізолювання цих речовин водою, підкисленою сірчаною кислотою, розробила В. І. Попова. Відповідно до цього методу, біологічний матеріал настоюють з водою, підкисленою сірчаною кислотою (рН = 2 ... 3). Отримані витяжки звільняють від домішок методом гель-хроматографії. Для цієї мети використовується гель сефадексе G = 25.

У склянку вносять 100 г подрібненого біологічного матеріалу, додають 80 мл 0,02 н. розчину сірчаної кислоти, перемішують і перевіряють рН середовища. При необхідності суміш доводять до рН = 2 ... 3 (всесвітній індикатору) 30% -м розчином сірчаної кислоти. Суміш біологічного матеріалу та підкисленою води настоюють протягом 2 год при частому перемішуванні. Потім витяжку зливають, а біологічний матеріал ще 2 рази наполягають з новими порціями 0,02 н. розчину сірчаної кислоти (по 80 мл) протягом 1 год. Кислі водні витяжки з'єднують, проціджують через складену в три шари марлі і центрифугують протягом 25-30 хв.

Супернатант (центрифугат) зливають з осаду і очищають від домішок методом гель-хроматографії. Цей метод забезпечує хорошу очистку барбітуратів, виділених з біологічного матеріалу.

Після очищення витяжок з біологічного матеріалу за допомогою методу гель-хроматографії отримують великі обсяги елюатів, в одному мілілітрі яких містяться малі кількості барбітуратів. Тому барбітурати, що знаходяться в Елюат, піддають екстракційного концентрування. З цією метою об'єднані кислі Елюат 3 рази збовтують з новими порціями хлороформу (по 50 мл) протягом 7 хв. Хлороформні витяжки, отримані після кожної екстракції, з'єднують і на водяній бані при 70 ° С відганяють з них 120-130 мл хлороформу. Частину, що залишилася упаренную Хлороформний витяжку при кімнатній температурі випарюють досуха. Сухі залишки використовують для ідентифікації та кількісного визначення барбітуратів за допомогою відповідних реакцій і методів.

3. Ізоляція барбітуратів підлуженою водою.

Подщелоченного воду для ізолювання барбітуратів з біологічного матеріалу вперше застосував П. Валов. Для осадження домішок, які переходять з біологічного матеріалу в витяжки, він використовував вольфрамат натрію. В даний час відомо кілька модифікацій методу Валова. Одна з модифікацій методу Валова, запропонована М. Д. Швайковой з співробітниками, наводиться нижче.

У склянку або в конічну колбу вносять 100 г подрібненого біологічного матеріалу, додають 180 мл води і 20 мл 10% -го розчину гідроксиду натрію. Вміст склянки (або колби) залишають на 30 хв при частому перемішуванні, а потім центрифугують протягом 30 хв (3000 об / хв). Від осаду відокремлюють надосадову рідину (центрифугат), до якої додають 120 мл 10% -го розчину вольфрамату натрію і 1 н. розчин сірчаної кислоти (до рН = 2). Рідина нагрівають на киплячій водяній бані протягом 20 хв, а потім піддають центрифугированию (30 хв). Центрифугат зливають з осаду і проціджують через ватний тампон, змочений водою. Проціджений рідина збирають в ділильну воронку. Тампон промивають водою (10 мл). Промивну воду теж виливають в ділильну воронку. До процеженной рідини додають рівний об'єм діетилового ефіру і збовтують протягом 15 хв. Ефірний шар відокремлюють і збовтують з 50 мл 10% -го розчину гідроксиду натрію. Лужний водний шар відокремлюють, подкисляют 25% -м розчином сірчаної кислоти до рН = 2 і збовтують з рівним об'ємом діетилового ефіру. Отриману при цьому ефірну витяжку використовують для виявлення і кількісного визначення барбітуратів.

4. Окремі представники токсичних сполук,
 видобутих хлороформом з кислою витяжки

Токсичних речовин, що екстрагуються хлороформом з кислою водної витяжки біологічного матеріалу відносяться препарати барбітурової кислоти, деякі алкалоїди слабоосновнимі властивостями - кофеїн, теобромін, теофілін, наркотин, стрихнін і бруцин, меконовой кислота і меконін, саліцилова кислота, фенацетин, синтетичні препарати групи піразолу - антипірин, амідопірин, препарати групи 1,4 - бензодіазепіну, ноксирон і ін.



РЕЧОВИНИ, що екстрагуються ОРГАНІЧНИМИ РОЗЧИННИКАМИ З КИСЛИХ ВОДНИХ витяжок | Барбітурати та методи їх дослідження

Методи виявлення барбітуратів хімічними методами | Виявлення барбітуратів методом хроматографії в тонкому шарі сорбенту | Кількісне визначення барбітуратів | барбаміл | Барбітал (веронал) 5 5-діетілбарбітуровая кислота | фенобарбітал | бутобарбітал | Етамінал- натрій | Виявлення етамінал-натрію | бензонал |

© um.co.ua - учбові матеріали та реферати