Головна

пофарбовані препарати

  1. адсорбуючі препарати
  2. Алкогольна залежність. Причини. Патогенез. Епідеміологія. Особливості у жінок і підлітків. Профілактика. Препарати для лікування алкогольної залежності.
  3. антибактеріальні препарати
  4. Антигіпертензивні препарати. Класифікація. Фармакологічна характеристика окремих груп препаратів. Побічні ефекти.
  5. Антигіпертензивні засоби. b-адреноблокатори. Механізми дії. Препарати. Показання до застосування. Побічні ефекти.
  6. Антидепресанти. Препарати, механізм дії. Застосування. Побічні ефекти. Виборчі інгібітори нейронального захоплення моноамінів.
  7. бактеріальні препарати

Для приготування забарвлених препаратів з досліджуваного об'єкта готують мазки і фіксують їх.

Фарбування.Стандартні барвники, що використовуються для фарбування бактерій - карболовий фуксин Ціля, фуксин Пфайффер і метиленовийсиній по Леффлера. Для отримання більш інформативних результатів в світлооптичної мікроскопії використовують спеціальні і диференційні методи забарвлення.

Спеціальні методи забарвлення бактерій.Найбільшого поширення знайшли методи Грама і Ціля-Нільсена

диференціюючі методизазвичай застосовують для фарбування різних морфологічних структур.

Капсули. Для забарвлення капсул бактерій застосовують методи Бурі-Гінс і Антоні; останній метод найбільш простий і включає забарвлення кристалічним фіолетовим з подальшою обробкою 20% водним розчином CuSO4.

Джгутики. Для забарвлення джгутиків запропоновані методи Леффлера, Бейлі, Грея і ін. Для цих методів характерні початкове протруювання препарату [зазвичай розчинами таніну, KAl (SO4)2, HgCl2] І подальша забарвлення (частіше карболовий фуксин Ціля).

Спори. Забарвлення суперечка бактерій проводять після попередньої обробки їх стінок. найбільш простий метод Пєшкова, що включає кип'ятіння мазка з синькою Леффлера на предметному склі з подальшою докраской нейтральним червоним. Спори фарбуються в синій колір, вегетативні клітини - в рожевий. Забарвлення по Граму відноситься до складного способу забарвлення, коли на мазок впливають двома барвниками, з яких один є основним, а інший - додатковим. Крім барвників при складних способах забарвлення застосовують знебарвлюючі речовини: спирт, кислоти та ін. Для забарвлення по Граму частіше використовують барвники трифенілметанового групи: генціановий, метиловий фіолетовий або крісталлвіолет. Грампозитивні Грам (+) мікроорганізми дають міцне з'єднання з зазначеними барвниками і йодом. При цьому вони не знебарвлюються при впливі на них спиртом, внаслідок чого при додатковій забарвленням фуксином Грам (+) мікроорганізми не змінюють спочатку прийнятий фіолетовий колір. Грам Грам (-) мікроорганізми утворюють з основними барвниками і йодом легко руйнується під дією спирту з'єднання. В результаті мікроби знебарвлюються, і потім забарвлюються фуксином, набуваючи червоний колір.

ФіксаціяПрі фіксуванні мазок закріплюється на поверхні предметного скла, і тому при подальшій забарвленням препарату мікробні клітини не змиваються. Крім того, убиті мікробні клітини фарбуються краще, ніж живі. Розрізняють фізичний спосіб фіксації, в основу якого покладено вплив високої температури на мікробну клітину, і хімічні способи, що передбачають застосування хімічних засобів, що викликають коагуляцію білків цитоплазми. Фізичний спосіб фіксації Предметне скло з препаратом беруть пінцетом або I і II пальцями правої руки за ребра мазком догори і плавним рухом проводять 2-3 рази над верхньою частиною полум'я пальника. Весь процес фіксації повинен займати не більше 2 с. Хімічний спосіб фіксації Для фіксації мазків застосовують метиловий спирт, ацетон, суміш Техніка фарбування за методом ПешковаВ Внаслідок зрілі ендоспори фарбуються в блакитний колір, молоді - в темно-синій, цитоплазма червона, зерна хроматину фарбуються в фіолетовий колір.

5. Будова і хімічний склад Кл стінки Г + і Г-. Бактерії з дефектом синтезу Кл стінки.

Поверхневий шар, розташований зовні від цитоплазматичної мембрани, називають клітинною стінкою. Стінка виконує захисну і опорну функції, а також надає клітині постійну, характерну для неї форму (наприклад, форму палички або кока) і являє собою зовнішній скелет клітини. Усередині бактеріальної клітини осмотичний тиск в кілька разів, а іноді і в десятки разів вище, ніж у зовнішньому середовищі. Тому клітка швидко розірвалася б, якби вона не була захищена такої щільної, жорсткою структурою, як клітинна стінка.

Товщина клітинної стінки 0,01-0,04 мкм. Вона становить від 10 до 50% сухої маси бактерій. Основним структурним компонентом стінок є муреин (глікопептид, мукопептидів). Це органічна сполука складної будови, до складу якого входять цукру, що несуть азот, - аміноцукри і 4-5 амінокислот. Складові частини клітинної стінки, її компоненти, утворюють складну міцну структуру. За допомогою способу забарвлення грам, бактерії можуть бути розділені на дві групи: грампозитивні та грамнегативні. грампозитивні організми здатні зв'язувати деякі анілінові барвники, такі, як кристалічний фіолетовий, і після обробки йодом, а потім спиртом (або ацетоном) зберігати комплекс йод-барвник. Ті ж бактерії, у яких під впливом етилового спирту цей комплекс руйнується (клітини знебарвлюються), відносяться до грамнегативних.

Клітинна стінка проникна: через неї поживні речовини вільно проходять в клітку, а продукти обміну виходять в навколишнє середовище. Великі молекули з великою молекулярною вагою не проходять через оболонку.

У грампозитивних бактерій (наприклад, у стафілококів або микрококков) клітинна стінка складається з багатошарової структури товщиною 70-80 нм, званої пептідогліканов. Пептидоглікановому мішок складається з полісахаридних ланцюгів, пов'язаних між собою в єдину мережу пептидними містками. На його частку у грампозитивних бактерій доводиться до 80% ваги їх клітинних оболонок. Крім пептидогликана до складу клітинних стінок цих бактерій входять тейхоевие кислоти. Тейхоевие кислоти внаслідок присутності в їх складі фосфорної кислоти забезпечують створення на поверхні клітин грампозитивних бактерій електронегативного заряду. Тейхоевие кислоти присутні тільки у грампозитивних бактерій. Основною відмінністю в будові оболонок грампозитивних і грамнегативнихбактерій є наявність у останніх крім цитоплазматичної ще однієї, так званої зовнішньої мембрани. Дана структура, яка знаходиться над тонким, одно-тришаровим пептидоглікановому мішком (8 нм), є типовою двуслойной мембраною, в якій виявлено досить багато досить унікальних компонентів: липополисахаридов, ліпопротеїнів, а також білків - порінов, з яких утворені пори у зовнішній мембрані, що дозволяють проникати в оболонку (і з неї в середу) порівняно низькомолекулярних сполук (зокрема, комплексу кристал-фіолетового з йодом - визначає забарвлення по Граму).протопластах, Весь вміст клітини, за винятком клітинної оболонки. Англійський вчений Е. Коккінг в 1960 запропонував спосіб отримання життєздатних протопластів шляхом обробки плазмолізірованной тканини рослин ферментами грибів, які руйнують клітинну оболонку. Протопласти можуть утворюватися також у дріжджів та інших мікроорганізмів в результаті автолізу, мутацій, дії антибіотиків та інших агентів, що призводять до втрати клітинної оболонки. мікоплазми і L-форми бактерій також є протопласти. Експериментальним шляхом їх отримують найчастіше при дії на клітини різними гідролазами. Висока осмотическая чутливість протопластов дозволяє легко їх лизировать і отримувати нативні макромолекули і структурні компоненти клітини, необхідні для проведення генетичних і молекулярно-біологічних досліджень. сферопласти - Бактеріальна клітина з частково зруйнованої (скороченої) клітинною стінкою, що характеризується нестійкістю до змін осмотичного тиску. Спочатку отримують сферопласти шляхом обробки клітин лізоцимом в фізіологічному розчині. L-форми - Бактерії, частково або повністю позбавлені клітинної стінки, але зберегли здатність до розвитку. Буква L - перша буква назви Лістеровского інституту в Лондоні, де вперше Еммі Кляйнебергер-Нобель звернула увагу на розвиток морфологічно дуже незвичайних клітин в культурі бактерій Streptococcus momliforniis, Виділеної з рідини вуха щура. Пізніше були описані L-форми у найрізноманітніших видів бактерій. Було показано, що L-форми виникають спонтанно або індуковано - під впливом агентів, які блокують синтез клітинної стінки (антибіотиків пеніцилінового ряду і циклосерина, ультрафіолетових і рентгенівських променів, амінокислоти гліцину) .L-форми утворюються в результаті незбалансованого зростання нормальних бактеріальних клітин в довжину і в товщину і тому поліморфні. Вони кулясті, ниткоподібні, присутні також і безструктурні маси. L-форми проходять через бактеріальні фільтри і легко руйнуються при механічних впливах. На відміну від нормальних клітин L-форми часто містять великі вакуолі. L-форми мають зниженим рівнем метаболічної активності, ніж вихідні бактерії. Вони нечутливі до дії будь-яких агентів, які впливають на клітинну стінку.

У L-форм не функціонують нормальні механізми клітинного ділення. В основному вони діляться з утворенням елементарних тіл, які відокремлюються від поверхні клітини або від мембрани вакуолі.

розрізняють стабільні і нестабільні L-форми. нестабільні L-форми мають елементами клітинної стінки і тому здатні перетворюватися в нормальні бактеріальні клітини після виключення дії фактора, що викликав їх освіту. стабільні L-форми повністю позбавлені ригидной клітинної стінки, що зближує їх з протопластами. Вони вкрай рідко повертаються в вихідні бактеріальні форми і існують без змін в різних умовах середовища. Дослідження L-форм представляють суттєвий інтерес для медичної мікробіології, оскільки в цій формі в організмі людини і тварин можуть зберігатися патогенні бактерії. При нераціональному використанні антибіотиків, що приводить до утворення L-форм з бактерій, може наступити поліпшення стану хворого. Однак після припинення прийому лікувального препарату настає перетворення L-форм в бактерії початкового вигляду з відновленням їх вірулентності, що призводить до рецидиву хвороби. Бактерії, у яких відсутня клітинна стінка, існують і в природі: це мікоплазми. Першим описаним представником микоплазм з'явився збудник плевропневмонії великої рогатої худоби. Подібні мікроорганізми виявлені і у інших тварин - овець, кіз, щурів, собак, а також у людини, всім їм було дано загальну назву PPLO (плевропневмоніеподобние організми).

4. Систематика мікроорганізмів. Принципи класифікації. Поняття вид. Таксономічні категорії. Номенклатура. Відмінності про- від еукаріот. Левенгук зазначив можливість диференціювати мікроорганізми за морфологічними ознаками. Пізніше робили спроби класифікувати мікроорганізми з метою розподілу їх по таксонам на підставі морфологічних і фізіологічних ознак.вид - Еволюційно сформована сукупність особин, що мають єдиний тип організації, який в стандартних умовах проявляється подібними фенотипическими ознаками: морфологічними, фізіологічними, біохімічними та ін. Перераховані ознаки в межах одного і того ж виду можуть варіювати = »варіанти (вари) мікроорганізмів, що відрізняються окремими ознаками від стандартних. Види, пов'язані генетичним спорідненістю об'єднують в пологи - »сімейства -« ... царства і подцарства. Патогенні бактерії відносяться до надцарству прокариотов, царству еукаріотів, гриби - до царства Мікота, найпростіші - до ц -ву протозоа, віруси - до ц Віра основі сучасної систематики лежать фенотипічні ознаки. морфологічні характеризують форму і структуру мікробної клітини, фізіологічні - Особливості росту мікроорганізму на штучних піт середовищах, морфологію колоній, біохімічні - Тип окисного і пластичного метаболізму, ферментацію вуглеводів, протеоліт ознаки. В даний час використовують ряд таксономічних систем: нумерічеськая, хемотаксономія, генетична і серологічна таксономії. Для назви мікроорганізмів використовується Біноміальна номенклатура Ліннея: перше слово -народилася, друге-вид. Зазвичай назва роду дається за прізвищем автора, або по його приналежності до певної морфологічної групі. Видова назва пов'язана з найменуванням захворювання, або з джерелом існування.штам - Культура, виділена з певного джерела, або з одного і того ж джерела в різний час. клон - Культура мікроорганізмів, виділена з однієї клітини. Чистий культура - Мікробні особини одного і того ж виду, вирощені на ізольованій колонії, вирощеної на твердому живильному середовищі.

У прокаріот відсутня мембрана, за допомогою яких органели мікробної клітини обмежені від цитоплазми. У прокаріотів є тільки цитоплазм мембрана, яка відокремлює цитоплазму від клітинної оболонки або від зовнішнього середовища. Ядро (нуклеоїд) має фібріальную структуру і не обмежена від цитоплазми ядерною мембраною. У клітинах прокаріотів відсутні мітохондрії, хлоропласти, КГ. ОВ ферменти локалізовані а похідних утвореннях цитоплазматичної мембрани - Мезосома. У прокаріотів відсутній мітоз, розмножуються бінарним поділом. Існую в гаплоіном стані. Відсутня у них клітинний центр. Для них нетипові внутрішньоклітинні переміщення цитоплазми і амебовідние рух.



Відкриття мікроорганізмів. Основні методи микроскопирования. Методи забарвлення. Вивчення морфології і окремих структур. | Морфологія, ультраструктура і Хім.состав спирохет, рикетсій, хламідій, мікоплазм

Мікробіолгія як фунд наука. Об'єкти і методи дослідження. Л. Пастер- основопола мікр. Вплив його робіт на розвиток мед Мікро. Завдання мед МІКРО, значення в деят лікаря | Роботи Коха і їх значення в практ мікрор і инфекц патології | Капсули. Джгутики. Пили. Методи виявлення. патогенні представники | Метаболізм бактерій. Ферменти і їх роль в обміні речовин. Конститутивні і індуцібельная, екзо і ендо- ферменти. Практичне використання біохім.актівності ферментів | Дихання бактерій. Основні типи біологічного окислення субстрату. Аероби, анаероби, факультативні анаероби, мікроанаерофіли. | Зростання і розмноження бактерій. Фази розмноження популяції бактерій в стаціонарних умовах. | Основні принципи і методи культивування бактерій. Фактори, що впливають на зростання і розмноження. Класифікація поживних середовищ і вимоги, що пред'являються до них. | Бактеріологічний метод дослідження, його етапи .. | Мікроскопічне вивчення колоній. | плазміди |

© um.co.ua - учбові матеріали та реферати