На головну

Дія дезинфікуючих речовин на мікроби. Перерахувати групи дезинфікуючих речовин за механізмом дії, назвати основні речовини кожної групи.

Дезинфікуючі речовини є загальтоксичними отрутами, на відміну від хімеотерапевтіческнх засобів і антибіотиків, оказива-чих виборче дію на мікроорганізми. Механізм дії дезінфікуючих речовин в основному заключастся в порушенні фізико-хімічної структури мікробної клітини

окислювачі (Хлор і його сполуки, речовини, що містять йод, перекис водню) мають підвищену здатність окисляти органічні сполуки в мікробної клітці, що призводить до її загибелі.

Речовини, що згортають білок (Фенол, крезол, гексахлорофен, лізол, спирти, солі важких металів, наприклад, сулема), проникаючи в мікробну клітину, вступають в з'єднання з її білками, денатурируют їх і таким чином порушують життєві функції мікроорганізму.

детергенти (Поверхнево-активні речовини (ПАР)) - речовини, що володіють високою поверхневою активністю, миючим, а багато хто з них і антимікробну дію - мила, миючі засоби. Високою активністю володіють четвертинні амонієві підстави (ПрАТ), що викликають пошкодження клітинної стінки бактерій, не проникаючи всередину клітини.

деякі метали в незначних кількостях мають виражену антимікробну дію (срібло, мідь, золото та інші). Пояснюється це тим, що вони виділяють у воду іони. Таке явище називають олігодінаміческім дією (грец. Oligos - малий). Досить ничтожною кількості іонів в рідині, щоб вони концентрувалися на поверхні мікробів і, змінивши її заряд з "-" на "+", надавали антимікробну дію.

Вибір способу дезінфекції залежить від біологічсскіх властивостей мікроба і від того середовища, в якій він знаходиться. Наприклад, сулема мало придатна для дезінфекції білкових субстратів, таких як гній, кров, харкотиння. Під впливом сулеми відбувається згортання білків, і згорнувся білок оберігає мікробів від дії дезин-фектанта. Етиловий спирт використовують для знезараження рук, різних предметів, для консервації біологічних об'єктом. Найбільш виражено бактерицидну дію 70% -ного спирту, оскільки чистий спирт викликає згортання поверхневих білків бактерій і не проникає всередину клітини.

Значним бактерицидну дію має гексахлорофен, причому коки більш чутливі до нього, ніж грамотріцательнве палички. Гексахлорофен застосовується для знезараження шкіри у вигляді мила, що містять 2-5% цієї речовини; для санації порожнини носа у вигляді мазі, що містить 1%, для санації носоглотки шляхом зрошення з метою боротьби зі стафілококовим носій-cibom - 0,1% -ний розчин.

Мікрофлора води, грунту, повітря. Санітарно-показові мікроорганізми. Виживання патогенних мікробів у зовнішньому середовищі. Некультивованих форми бактерій. Значення для медичної практики.

Характеризуючи мікрофлору грунту, води і повітря, доцільно дотримуватися певного плану:

1) постійна мікрофлора даного середовища;

2) значення даного середовища як фактора передачі збудників захворювань;

3) визначення мікробної флори.

При дослідженні об'єктів зовнішнього середовища методами санітарної мікробіології визначаються кількісні показники - загальна кількість мікроорганізмів в певному обсязі. Важливим завданням дослідження є виявлення патогенних мікробів і їх токсинів. Однак безпосереднє їх виявлення представляє значні труднощі. Причина в тому, що патогенні мікроорганізми зустрічаються в зовнішньому середовищі не постійно, зазвичай в невеликих кількостях, їх важко культивувати на поживних середовищах, деякі з них взагалі не культивуються на штучних середовищах. Тому можливе забруднення зовнішнього середовища патогенними мікробами визначають за непрямим показником - виявлення санітарно-показового мікроорганізму.

Як санітарно-показових вибирають ті мікроби, які постійно і у великих кількостях містяться в тих виділених людини, які для цього середовища є найбільш небезпечними. Терміни їх виживання у зовнішньому середовищі повинні збігатися приблизно з термінами виживання патогенних мікробів. Санітарно-показові мікроорганізми не повинні інтенсивно розмножуватися в зовнішньому середовищі і повинні легко виявлятися при лабораторному дослідженні.

мікрофлора грунту

Грунт є основним середовищем існування багатьох мікроорганізмів, які разом з рослинами і тваринами складають різноманітні біогеоценози. Склад мікробіоценозів грунту залежить від багатьох зовнішніх факторів, в тому числі від агротехнічних заходів, таких як оранка, внесення добрив, отрутохімікатів.

Найповерховіший тонкий шар грунту містить мало мікроорганізмів, так як вони гинуть під впливом сонячних променів і висушування. Найбільш багата мікрофлора грунту на глибині 10-20 см, а в більш глибоких шарах кількість мікробів зменшується.

Видовий склад грунтової мікрофлори дуже різноманітний: анаеробні і аеробні бактерії, гриби, найпростіші, віруси.

Значення мікрофлори грунту велике для кругообігу речовин в природі. Мікроби здійснюють розкладання і мінералізацію органічних тварин і рослинних залишків, що потрапляють в грунт, процес очищення її від нечистот і покидьків.

Серед патогенних мікробів є такі, для яких грунт є постійним місцем проживання. Це збудники ботулізму, ак-тіноміцети і гриби - збудники мікозів. Друга група - це спо-рообразующіе бацили і клостридії, які потрапляють в грунт з виділеннями людини і тварин і можуть тривалий час тут зберігатися у вигляді спор. Це бацили сибірської виразки, клостридії правця і газової анаеробної інфекції.

До третьої групи належать неспорообразующие бактерії і віруси, які потрапляють в грунт з виділеннями людини і тварин, зберігаються тут протягом кількох днів і місяців. Це бактерії - збудники черевного тифу і дизентерії, палички туберкульозу, лептоспіри, віруси. Значення ґрунту як фактора передачі при цих інфекціях відносно невелике.

Мікробіологічне дослідження грунту має значення при будівництві жител, дитячих установ, водосховищ. Проби ґрунту беруть з глибини. Визначають мікробне число - загальна кількість мікроорганізмів в 1 г грунту і наявність санітарно-показових мікроорганізмів. Присутність в грунті Escherichia coli і Streptococcus faecalis вказує на свіже фекальне забруднення, бактерій роду

Citrobacter і Enterobacter - на несвіже, a Clostridium perfringens - на давнє.

мікрофлора води

Вода відкритих водойм, подібно грунті, є природним місцем існування багатьох видів бактерій, грибів, вірусів, найпростіших. У воді живуть також різні види мікробів, які беруть участь у кругообігу речовин у природі і сприяють самоочищення води завдяки розкладанню органічних сполук. Характер мікрофлори води залежить від багатьох причин, і особливо від забруднення стоками зливових, фекальних та промислових нечистот. У міру віддалення від населених пунктів кількість мікробів поступово зменшується. Найбільш чистими є води глибоких артезіанських свердловин і джерел.

Вода має епідеміологічне значення як фактор передачі інфекцій. Спостерігалися водні епідемії холери, черевного тифу, леп-тоспірозов та інших інфекційних хвороб.

Санітарно-показовими мікроорганізмами для води є бактерії групи кишкової палички (БГКП), що належать до різних родів сімейства ентеробактерій. Санітарно-мікробіологічний стан води оцінюється за такими показниками:

1) мікробне число - загальна кількість бактерій в 1 мл води;

2) коли-титр - найменший об'єм води в мілілітрах, в якому виявляються БГКП;

3) колі-індекс - кількість БГКП в 1 літрі води;

4) крім того, у воді визначають наявність патогенних і умовно мікроорганізмів: ентерококів, сальмонел, холерного вібріона, ентеровірусів.

Відповідно до ГОСТу на питну водопровідну воду, мікробне число її повинно бути не більше 100, колі-титр повинен бути не нижче 300, колі-індекс - не більше 3.

мікрофлора повітря

У повітря мікроби потрапляють з грунту з поверхонь рослин і тварин, а також з промисловими відходами деяких підприємств. На відміну від води і грунту, де мікроби можуть розмножуватися, в повітрі вони тільки зберігаються протягом деякого часу, а потім гинуть внаслідок висихання і впливу сонячних променів. Стійкі до таких дій мікроорганізми можуть довго зберігатися в повітрі. Це спори грибів, спори бактерій, сарціни і інші коки, що утворюють пігменти. Найбільше мікробів в повітрі промислових міст, найменше - в повітрі лісів і гір. У відкритому повітрі кількість мікробів влітку більше, ніж взимку, в повітрі закритих приміщень - навпаки.

Повітря може служити фактором передачі патогенних мікробів: стафілококів, стрептококів, паличок дифтерії, коклюшу, туберкульозу, а також вірусів кору, грипу. Передача повітряно-крапельним і повітряно-пиловим шляхом майже завжди відбувається в закритих приміщеннях і рідко - на відкритому повітрі.

Показники санітарно-мікробіологічного стану повітря

закритих приміщень:

- Мікробне число - кількість мікробів, виявлених в 1 м3

повітря;

- наявність санітарно-показових бактерій: Streptococcus haeraolyticus і Staphylococcus aureus.

Чистота повітря залежить від своєчасного провітрювання приміщення і вологого прибирання. Застосовується обробка повітря бактерицидними УФ-лампами. Для зменшення контамінації повітря застосовують марлеві і ватно-марлеві маски.

35. Бактеріологічне дослідження води: показники, методи їх визначення та оцінка.

Санітарно-гюказательнимі мікроорганізмами для води є бактерії групи кишкової палички (БГКП), що належать до різних родів сімейства ентеробактерій. Санітарно-мікробіологічний стан води оцінюється за такими показниками:

1) мікробне число - загальна кількість бактерій в 1 мл води;

2) коли-титр - найменший об'єм води в мілілітрах, в якому виявляються БГКП;

3) колі-індекс - кількість БГКП в 1 літрі води;

4) крім того, у воді визначають наявність патогенних і умовно мікроорганізмів: ентерококів, сальмонел, холерного вібріона, ентеровірусів.

Відповідно до ГОСТу на питну водопровідну воду, мікробне число її повинно бути не більше 100, колі-титр повинен бути не нижче 300, колі-індекс - не більше 3.

Визначення мікробного числа води

Водопровідну воду засівають в обсязі 1 мл, воду відкритих водойм -в обсягах 1,0; 0,1; 0,01 мл. Всі проби вносять в стерильні чашки Петрі, після чого їх заливають 10-12 мл розплавленим і охолодженим до 45-50 ° С живильним агаром, який ретельно перемішують з водою. Посіви інкубують при 37 ° С протягом 24-48 год. Воду з відкритих водойм засівають паралельно на дві серії чашок, одну з яких інкубують при 37 ° С протягом доби, а іншу -2 добу при 20 ° С. Потім підраховують кількість вирослих на поверхні і в глибині середовища колоній і обчислюють мікробне число води - кількість мікробів в 1 мл.

Визначення колі-титру та колі-індексу води

Коли-титр води вимірюється мінімальною кількістю води (в мл), в якому виявляються БГКП, кол і - індеке- кількістю БГКП, що містяться в 1 л досліджуваної води. Коли-титр води визначають бродильним методом і методом мембранних фільтрів.

Бродильний метод. Воду відкритих водойм в обсягах 100; 10; 1 і 0,1 мл засівають в глюкозопептонную середу, причому для посівів великих кількостей води (100 і 10 мл) використовують концентровану середу, що містить десятикратні кількості зазначених речовин.

Склад глюкозопептонной середовища: 1% пептонна вода, 0,5% глюкози, 0,5% хлориду натрію, індикатор Андреде і поплавок.

Для дослідження водопровідної води роблять посів 4 проб по 100 мл і Ю проб по 10 мл або 3 проб по 100 мл і 3 проб по 10 мл в концентровану середу і 3 проб по 1 мл в звичайну глюкозопептонную середу. Посіви інкубують протягом доби при 37 ° С. Про бродінні судять по наявності бульбашок газу в поплавці. З заграли або помутнілих проб проводять посіви на середовище Ендо. З вирослих колоній роблять мазки, фарбують за Грамом і ставлять оксидазний тест, що дозволяє диференціювати бактерії пологів Esherichia, Citrobacter та Enterobacter від грамнегативних бактерій родини Pseudomonadacae і інших оксідазаположітельних бактерій, що мешкають у воді, З цією метою скляною паличкою знімають 2-3 ізольовані колонії з поверхні середовища і наносять штрихом на фільтрувальний папір, змочену диметил-п-фенілендіаміном. При негативному Оксидазний тесті колір паперу не змінюється, при позитивному - вона забарвлюється в синій колір протягом 1 хв.

Грамнегативні палички, що не утворюють оксидазу, знову досліджують в бродильном тесті -вносить в напіврідкий поживний агар з 0,5% глюкози і інкубують при 37 ° С протягом доби. При позитивному результаті визначають колі-титр та колі-індекс за таблицями ГОСТу 18963-73.

Метод мембранних фільтрів. Мембранний фільтр № 3 поміщають в воронку Зейтца, вмонтовану в колбу Бунзена, яка приєднується до вакуум-насоса. Мембранні фільтри попередньо стерилізують кип'ятінням в дистильованої воді. Воду з водопровідної мережі Москви і Ленінграда і воду артезіанських свердловин фільтрують в обсязі 500 мл, воду інших міст - у обсязі 333 мл. Чисту воду відкритої водойми фільтрують в обсязі 100; 10; 1 і 0,1 мл, більш забруднену перед фільтрацією розводять стерильною водою. Потім фільтри завадять на поверхню середовища Ендо в чашку Петрі і після інкубації при 37 ° С протягом доби підраховують кількість колоній, що виросли, типових для БГКП. З 2-3 колоній червоного кольору готують мазки, фарбують за Грамом і ставлять оксидазний тест. Для цього фільтр з виросли на ньому колоніями бактерій переносять пінцетом, не перевертаючи на гурток фільтрувального паперу, змоченою диметил-п-фенілендіаміном. При наявності оксидази індикатор забарвлює колонію в синій колір. Дві-три колонії, що не змінили первісну забарвлення, засівають в напіврідку середу з 0,5% глюкози. Посіви інкубують протягом доби при 37 ° С. При наявності газоутворення підраховують кількість червоних колоній на фільтрі і визначають колі-індекс, з значення якого обчислюють колі-титр. Наприклад, якщо колі-індекс дорівнює 5. то коли-титр складе 200 (1000: 5 = 200).

Загальна кількість бактерій в 1 мл нерозділеного воли, не більше 100.

Кількість БГКП 3.

При використанні рідких середовищ накопичення коли - титр, не менше 333.

Для визначення титру Staph. faecalis готують десятикратні розведення води. Цільну воду і її розведення в обсязі 1 мл засівають в одну з рідких елективних середовищ (КФ, Полімік-синовите і ін.), Інкубують при 37 ° С протягом 2 діб, а потім через 24 і 48 год виробляють висіву на чашки з щільними елективних-диференціальними середовищами: агар КФ, агар ТТХ (середа з тріфенілтетразолхлорідом), поліміксінотеллурітний агар. Ідентифікують фекальні стрептококи по виду коло-ний, морфології клітин і забарвленням по Граму. На середовищі з ТТХ Staph. faecalis утворює колонії темно-червоного кольору, на агарі з телуриту - чорного кольору.

Склад Серед. Середа КФ: 2% поживний агар з 1% дріжджового екстракту, 2% Мальтон, 0.1% лактози, 0,4% анида натрію, 0,06% кацбоната натрію, індикатор бромкрезоловий червоний. Поліміксіновая середовище: поживний агар, 1% дріжджового екстракту, 1% глюкози, полімнксін М 200 ОД / мл, індикатор бромтимоловий синій. Поліміксінотеллурітний агар: поживний агар, дріжджовий екстракт, 1% глюкози, кристалічний фіолетовий 1: 800 000, поліміксин М 200 ОД / мл, 0.01% теллурита калію, агар ТТХ: поживний агар, 1% дріжджового екстракту, 1% глюкози, кристалічний фіолетовий 1 : 800000, 0,01% ТТХ.

При визначенні індексу Staph. faecalis користуються статистичними таблицями, застосовуваними при встановленні коли-індексу. Крім того, з цією метою використовують метод мембранних фільтрів.

Для виявлення патогенних бактерій максимальні обсяги води пропускають через мембранні фільтри, які потім поміщають в рідкі елективні середовища або на поверхню щільних диференційно-діагностичних середовищ.



 Вплив біологічних чинників |  Генетичний апарат бактерій і його особливості у вірусів. Поняття про генотип і фенотип мікроорганізмів. Символічні позначення генотипических і фенотііческіх ознак.

 Методи культивування вірусів |  Принципи класифікації вірусів. Репродукція вірусів (фази взаємодії з клітиною хазяїна). |  Харчування бактерій. Типи харчування. Механізми переносу речовин в клітку. Фактори зростання мікроорганізмів. |  Біологічне окислення (енергетичний метаболізм) |  Зростання і розмноження мікроорганізмів |  Живильні середовища. Класифікація їх за призначенням, походженням, складом. Основні вимоги до живильних середовищ. Приготування МПБ і МПА. |  живильні середовища |  Процес дихання мікроорганізмів. Класифікація мікроорганізмів за способом дихання. Схеми біологічного окислення у аеробів і анаеробів. |  Ферменти мікробів. Класифікація по біологічної ролі і субстратної специфічності; використання для ідентифікації мікробів. |  Вплив хімічних факторів |

© um.co.ua - учбові матеріали та реферати