H2N- СН - СО - (NН - СН - СО) n - NН - СН - СООН | Б > кадаверин | Класифікація ферментів. | Вплив на активність ферментів активаторів і інгібіторів. | Перевірте себе. | Класифікація та номенклатура вітамінів | Перевірте себе. | Розрахунково-графічні завдання. | Класифікація вуглеводів | Перевірте себе. |

загрузка...
загрузка...
На головну

Рослинний альбумін.

  1. Грунтово-рослинний покрив

25 г пшеничного борошна змішують зі 100 мл дистильованої води і перемішують отриману суміш протягом години. Отриману суспензію борошна центрифугируют, і прозорий розчин обережно зливають з центрифужних стаканчиків в колбу.

Прозорий розчин містить переважно альбумін пшеничних зерен (3).

Устаткування і реактиви: лабораторний центрифуга, воронка, фільтри, розчини білків, насичений розчин сірчанокислого амонію, хлористий натрій в порошку, сірчанокислий магній в порошку, 1% і 10% розчин гідроксиду натрію, 5% розчин сірчанокислої міді, 5% розчин оцтовокислого свинцю.

Досвід 1. Висолювання білків сірчанокислим амонієм.

Наливають в пробірку 1 -1,5 мл розчину білка (2), додають рівний об'єм насиченого розчину сірчанокислого амонію і злегка струшують суміш до появи каламуті. Поясніть, який білок випадає в осад?

Каламутну рідину фільтрують через сухий складчастий фільтр. Отриманий прозорий розчин поміщають в пробірку і нагрівають до кипіння. Що при цьому відбувається? Який білок в цьому випадку випадає в осад?

Досвід 2. Висолювання білків хлористим натрієм і сірчанокислим магнієм.

У дві пробірки наливають по 2-3 мл розчину білка (2). Додають при перемішуванні до повного насичення розчину, тобто до моменту, коли частина кристалів солей перестають розчинятися, в одну пробірку тонко подрібненого хлористого натрію, а в іншу сірчанокислого магнію, через кілька хвилин в обох пробірках з'являється осад. Поясніть, який білок переходить в нерозчинний стан в цих дослідах?

Вміст пробірок фільтрують і додають до фільтрату кілька крапель розведеної оцтової кислоти до слабокислою реакції. Що при цьому відбувається?

У водному розчині білків їх частки є зарядженими і сильно гідратованих. Ці фактори обумовлюють стійкість білкових розчинів. Але при високій концентрації солей відбувається руйнування водних оболонок білкових молекул за рахунок гідратації іонів солі, тобто молекули води переходять з гідратної оболонки білка в гідрадну оболонку відповідних іонів і слідом за цим настає зняття заряду з білкової молекули в слабокислою середовищі адсорбує на ній іонами солі, в результаті цих двох процесів білкові розчини втрачають стійкість, частки білка злипаються один з одним і випадають в осад.

Досвід 3. Згортання білків при нагріванні.

У три пробірки наливають по 2 мл розчинів білка (1,2,3) а) нагрівають вміст першої пробірки. Що при цьому відбувається?

б) додають в другу пробірку близько 0,5 мл 10% розчину оцтової кислоти і нагрівають. Утворюється осад білка в цьому випадку?

в) додають в третю пробірку близько 0,5 мл 10% розчину гідроксиду натрію і нагрівають. Чи відбуваються які-небудь зміни з розчином?

Випадання білків і осад при нагріванні (згортання) характерно майже для всіх білків (виняток становить желатину). Особливо легко і повно відбувається осадження білків в слабокислою середовищі, поблизу від ізоелектричної точки. У сильно кислому середовищі осадження білків йде значно гірше, а в лужному середовищі зовсім не спостерігається. Білки, як амфотерні електроліти, можуть диссоциировать як кислоти і як підстави. Схематично, молекулу білка можна представити таким чином:

H?N - R - COOH.

У водному середовищі, особливо поблизу ізоелектричної точки, молекули білка є нейтральний, біполярний іон:

H?N -R -COO~.

У кислому середовищі пригнічується кислотна дисоціація білка, і молекула заряджається позитивно:

?H?N ??-R- COO? + H? -------- ?H?N - R - COOH,

а в лужному середовищі пригнічується, основна дисоціація білка і молекули його несуть негативний заряд. Наявність заряду перешкоджає осадження білка, тому в кислих і лужних розчинах білок знаходиться в розчиненому стані навіть при його кип'ятінні.

Дослід 4. Осадження білків солями важких металів.

У дві пробірки наливають по 1 - 1,5 мл розчину білка (3) і повільно по краплях при струшуванні додають в одну з них розчин сірчанокислої міді, а в іншу - розчин оцтовокислого свинцю. В обох випадках утворюються пухкі опади внаслідок утворення малорастворимого солеобразний з'єднання.

Відзначте колір опадів в обох пробірках.

Після утворення опадів додайте в обидві пробірки надлишок відповідних солей (2 - 2,5 мл). Що відбувається в цьому випадку?

Солі важких металів (Hg, Ag, Cu, Pb і ін.) Викликають необоротне осадження білків, утворюючи з ними нерозчинні компоненти. Внаслідок цього білки застосовуються в якості протиотрути при отруєнні солями важких металів. Однак деякі з таких опадів розчиняються в надлишку осадителя в результаті пептізаціі осаду адсорбує на його частинках іонами осадителя.



Класифікація білків | Досвід 1. Реакція з азотно-ртутним реактивом (реакція Миллона).
загрузка...
© um.co.ua - учбові матеріали та реферати