Головна

Дослід 4. Визначення ступеня денатурації білка

  1.  I. Визначення термінів і предмет дослідження
  2.  II. Визначення закону руху системи.
  3.  III. Розкрийте дужки, вживши прикметник або прислівник у відповідній ступеня порівняння.
  4.  V. Визначення ціни і обсягу виробництва в умовах монополії.
  5.  А) Визначення сторін горизонту за Сонцем
  6.  А. Визначення зносу об'єкта нерухомості
  7.  А.1 Визначення освітленості на робочих місцях

У харчовій технології особливе практичне значення має процеси гідролізу і денатурації білків. В основі денатурації білків лежить порушення впорядкованого розташування поліпептидних ланцюгів у вторинної, третинної структурі молекули в результаті розриву деяких внутрішньо молекулярних зв'язків. При денатурації змінюються фізичні властивості білків, знижується їх розчинність, здатність до гідратації, агрегування, втрачаються біологічні властивості.

В результаті розриву внутрішньомолекулярних зв'язків (водневих, сольових) пептидні ланцюга частково розгортаються, в результаті чого функціональні групи стають більш активними або більш доступними для впливу реагентів або ферментів. Для теплової денатурації білків особливо характерно збільшення реактивності -SH- груп.

Денатурація білків відбувається під впливом тепла, починаючи з 60 ?С, при механічному впливі (тиску, розтиранні, струшуванні і т.д.) і під дією хімічних реагентів.

Прилади і реактиви: 0,5 М розчин хлориду калію; біуретового реактив (1,5 г сульфату міді (CuSO4· 5H2O) і 6,0 г виннокислого натрію-калію (NaKC4H4O6· 4H2O) розчиняють в 500 мл води. До цього розчину при хорошому помішуванні додають 300 мл 10% розчину NaOH вільного від Na2CO3, І 2 г KI для запобігання самовільного відновлення. Розчин доводять до 2 мл і зберігають в поліетиленовій склянці).

Примітка. Біуретову реакцію можна проводити в присутності солей амонію на увазі утворення мідноаміачних комплексів.

витяг білків здійснюють одним з перерахованих нижче способів:

1) Розчин рослинних білків. До 40 г пшеничного борошна додають 160 мл дистильованої води, перемішують і колбу переносять в холодильник (1-2 ° С) на добу, потім знову перемішують і фільтрують спочатку через гигроскопическую вату, а потім через складчастий паперовий фільтр. Розчин містить головним чином альбуміни. Зберігають в холодильнику.

2) Відважують 5 г борошна, заливають 10 мл розчину хлориду калію (Ксi) і ставлять на встряхиватель на 5 хвилин. Отриману суспензію переносять у центрифужную пробірку на 50 мл і додають 35 мл розчину Ксi. Пробірки закривають гумовими пробками і струшують 15 хвилин. Через 15 хвилин осад відокремлюють на центрифузі при 5000 об / хв протягом 5 хвилин. Екстракт зливають в мірну колбу на 100 мл через лійку з ватним фільтром, який поміщають в шийку воронки. Витяг розчином Ксi повторюють ще три рази, але з 10 мл розчинника. При ретельному добуванні, в сольову витяжку переходять не менше 30% від загальної кількості азоту. Після додавання нової порції розчинника осад у пробірці добре перемішують паличкою. Екстракцію сольовим розчином закінчують промиванням осаду 20-30 мл дистильованої води, яку після перемішування і центрифугування зливають в мірну колбу з сольовими витяжками і доводять до мітки водою.




 Загальні відомості |  Методика виконання роботи |  Визначення амилолитической активності солоду |  Визначення амилолитической здатності (АС) ферментних препаратів |  Загальні відомості |  Досвід 1. Визначення редукуючих цукрів в продуктах рослинного походження по Іссекутцу |  Методика виконання роботи |  Дослід 2. Визначення глюкози за методом Вильштеттера і Шудля |  Методика виконання роботи |  Оформлення результатів досвіду |

© um.co.ua - учбові матеріали та реферати