Головна

Визначення амилолитической активності солоду

  1.  I. Визначення термінів і предмет дослідження
  2.  II. Визначення закону руху системи.
  3.  V. Визначення ціни і обсягу виробництва в умовах монополії.
  4.  А) Визначення сторін горизонту за Сонцем
  5.  А. Визначення зносу об'єкта нерухомості
  6.  А.1 Визначення освітленості на робочих місцях
  7.  А. К. Михальська. Основи риторики. Визначення сучасної риторики

Необхідні реактиви і посуд:

1 М розчин NаОН, 1,0 М розчин йоду, 1 М розчин сірчаної кислоти, 0,1 М розчин тіосульфату натрію, 2% буферний розчин крохмалю, ацетатний буферний розчин рН 4,3.

Мірний циліндр місткістю 500 см?, скляний стакан місткістю 500 см?, мірна колба місткістю 200 см?, піпетки місткістю 100, 50, 10, 5 см?, конічна колба місткістю 250 см?, водяна баня, електрична плита, воронка, фільтрувальна папір.

Для аналізу необхідно 20 г солоду або 40 г ячменю.

техніка визначення

Для визначення амилолитической активності використовується водна витяжка ячменю, свежепроросшего або сухого солоду. При дослідженні ячменю використовують навішення ячмінного борошна в 40 г, при дослідженні сухого солоду -20 г, а при дослідженні свежепроросшего солоду, особливо в останню добу пророщування - 10 м свежепроросшего солод відокремлюють від паростків, подрібнюють на м'ясорубці, в ступці або лабораторному млині. Наважку борошна (10-40 г) поміщають в скляний стакан місткістю 500 см?, додають 450 см? дистильованої води, проводять екстракцію протягом 1 години на водяній бані при температурі 40?С при періодичному помішуванні і скляною паличкою вмісту склянки. Стакан охолоджують під струменем холодної води і доводять на технічних вагах до маси 520 г. Вміст склянки перемішують і фільтрують через складчастий паперовий фільтр. Перші порції фільтрату повертають на фільтр.

У мірну колбу місткістю 200 см? піпеткою відмірюють 100 см? 2% розчину крохмалю і витримують колбу на водяній бані при температурі 20 ?С протягом 20 хвилин. Потім в колбу додають 5 см? солодовою витяжки, вміст колби перемішують і витримують на водяній бані при температурі 20 ?С протягом 30 мінет для гідролізу крохмалю, після чого процес гідролізу зупиняють додаванням 3 см? 1 М розчину NаОН. Колбу доводять дистильованою водою до мітки і перемішують.

Відмірюють 50 см? Осахаренний розчину крохмалю в конічну колбу місткістю 250 см?. Далі в колбі вносять 25 см? 0,1 М розчину йоду, 3 см? 1 М розчину NаОН, перемішують, витримують у темному місці 5 хвилин при кімнатній температурі. Потім в розчин додають 4,5 см? 1 М розчину сірчаної кислоти, перемішують і оттітровивают надлишок йоду 0,1 М розчином тіосульфату натрію до знебарвлення розчину. Індикатором служить міститься в розчині неосахаренной крохмаль, що надає розчину синій колір.

Кількість йоду, який пішов на окислення мальтози, має перебувати в межах 5-15 см. Якщо в реакції зв'язується більше 15 см? йоду, то дослід повторюють з витяжкою, приготовленої з 10 г солоду, якщо ж кількість зв'язаного йоду менше 5 см?, то дослід повторюють з витяжкою, приготовленої з 40 г солоду.

У проведеному визначенні загальна кількість йоду витрачається не тільки на окислення утворилася мальтози, але і зв'язується речовинами солодовою витяжки та крохмалю. Тому визначають і в розрахунках враховують такі поправки.

Поправка на солодовий витяжку. У конічну колбу місткістю 250 см? відміряють 12,5 см? витяжки, додають 37,5 см? дистильованої води. Загальний обсяг повинен становити, як і в основному досвіді 50 см?. Потім в колбу додають 25 см? 0,1 М розчину йоду, 3 см? 1 М розчину NаОН, перемішують, витримують у темному місці 5 хвилин. Потім в розчин додають 4,5 см? 1 М розчину сірчаної кислоти, перемішують і оттітровивают 0,1 М розчином тіосульфату натрію до знебарвлення розчину. Так як в основному досвіді 50 см? реакційної суміші містять 1,25 см? солодовою витяжки, то при розрахунках беруть десяту частину знайденої величини.

Поправка на розчин крохмалю. У конічну колбу місткістю 250 см? відміряють 25 см? буферного розчину крохмалю, додають 10 см? 0,1 М розчину йоду і 3 см? 1 М розчину NаОН, перемішують і витримують у темному місці 5 хвилин. Потім розчин підкислюють додаванням 4,5 см? 1 М розчину сірчаної кислоти і оттітровивают 0,1 М розчином тіосульфату натрію до знебарвлення розчину.

Розрахунок амилолитической активності проводять за формулою 6.2:

АС = (а - (  + С)) · До · 17,1, (6.2)

де: а - кількість 0,1 М розчину йоду, пов'язаного в основному

досвіді, см?;

в - кількість 0,1 М розчину йоду, пов'язаного з солодового

витяжкою, см?;

с - кількість 0,1 М розчину йоду, пов'язаного з розчином

крохмалю, см?;

К-коефіцієнт розведення солодовою витяжки в досвіді (при

використанні 10 г солоду К = 4, при 20 г К = 2, при 40 г К = 1);

17,1 - число мг мальтози, еквівалентну 1 см? 0,1 М розчину

йоду.

Кількість 0,1 М розчину йоду, пов'язаного в основному досвіді розраховують за формулою 6.3:

А = 25 - d, (6.3)

де d - кількість 0,1 М тіосульфату натрію, який пішов на

титрування в основному досвіді.

Кількість 0,1 М розчину йоду, пов'язаного з солодового витяжкою розраховують за формулою 6.4:

В = 25 - е, (6.4)

де: е - кількість 0,1 М розчину тіосульфату натрію, який пішов

на титрування солодовою витяжки.

Кількість 0,1 М розчину йоду, пов'язаного з розчином крохмалю розраховують за формулою 6.5:

С = 10 - f, (6.5)

де: f- кількість 0,1 М розчину тіосульфату натрію, який пішов на

титрування розчину крохмалю.

 




 Загальні відомості |  Загальні відомості |  Досвід 1. Визначення редукуючих цукрів в продуктах рослинного походження по Іссекутцу |  Методика виконання роботи |  Дослід 2. Визначення глюкози за методом Вильштеттера і Шудля |  Методика виконання роботи |  Оформлення результатів досвіду |  Методика виконання роботи |  Загальні відомості |  Досвід 1. Поділ альбумінів і глобулінів яєчного білка методом висолювання |

© um.co.ua - учбові матеріали та реферати