Головна

Поділ зеленого барвника листя методом колонкової адсорбційної хроматографії

  1.  F. Рішення квадратних систем лінійних алгебраїчних рівнянь (СЛАР) матричним методом і за правилом Крамера
  2.  I. Виділення сильномагнітних фракцій сухим методом
  3.  II. Доцільність обгрунтування розвитку меліоративної галузі в системі агропромислового комплексу програмно - цільовим методом.
  4.  Алгоритм розрахунку перехідного процесса класичним методом
  5.  Алгоритм розрахунку стрижневих систем методом переміщень
  6.  Алгоритм розрахунку чистого грошового потоку за непрямим методом
  7.  Бекон висунув новаторську ідею, відповідно до якої головним методом пізнання повинна стати індукція.

Розітремо в ступці 10 г багатих хлорофілом листя (наприклад, молодого листя кропиви), додавши до них трохи піску. Для нейтралізації кислоти, яка присутня в рослині, можна додати на кінчику шпателя карбонат кальцію. До отриманої кашки в посудині, який потрібно надійно закрити, приплив суміш 45 мл низькокиплячого бензину (газоліну), 5 мл бензолу і 15 мл метанолу. (Обережно! Легкозаймистий!)

Замість суміші цих трьох розчинників можна взяти 50 мл пропанона (ацетону). Суміш витримаємо в темному місці не менше години, час від часу збовтуючи. Тим часом підготуємо колонку з адсорбентом. Візьмемо скляну трубку завдовжки 18-20 см з внутрішнім діаметром 8-15 мм, зміцнимо її вертикально і закриємо знизу пробкою, в якій просвердлити отвори. Зверху на пробку покладемо шматочок марлі і шар вати, щоб порошкоподібний адсорбент, який треба дуже щільно утрамбувати скляній або дерев'яною паличкою, не висипався з колонки. Насиплемо в колонку спочатку свіжопрокаленого окис алюмінію, так щоб вона зайняла 2-3 см по висоті. Над цим шаром повинен розташовуватися шар подрібненого до тонкого порошку карбонату кальцію висотою 4 см. (Можна шматочки мармуру або крейди висушити нагріванням в фарфоровому тиглі, а потім подрібнити.) Ще вище помістимо шар дуже тонко розмеленої висушеної цукрової пудри висотою 6 см. Можна приготувати колонку і простіше, склавши адсорбент всього з двох шарів. У цьому випадку нижній шар висотою 3 см повинен складатися з свіжопрокаленого окису алюмінію, а над ним, відділений від нього тонким прошарком вати, повинен розташовуватися шар непрожарений окису алюмінію висотою 10 см. Досвід непогано вийде навіть при заповненні трубки однієї цукровою пудрою.

Отфильтруем розчин хлорофілу від залишків рослинних клітин і піску. У світлі, фільтрат виглядає смарагдово-зеленим, а у відбитому світлі виявляє чудову червону флуоресценцію. Нам потрібно ще відокремити від фільтрату метанол. При струшуванні фільтрату з водою утворюється два шари. За допомогою ділильної лійки або простого відсмоктування піпеткою можна відокремити пофарбований шар бензолу і бензину від безбарвного метанольна-водного шару (Ні в якому разі не відсмоктувати ротом!

Про небезпеку метанолу сказано раніше. Бензол - також сильна отрута, що отруює кров.

Розрідження в піпетці створюють за допомогою груші або водоструминного насоса. Найзручніше набирати рідину в піпетку шприцом (без голки), щільно з'єднаний з піпеткою шматочком гумового шланга. - Прим. перев.).

Потім з'єднаємо колонку з колбою для відсмоктування, останню підключимо до Водоструминні насоси і пропустимо через колонку кілька мілілітрів бензину. Продовжуючи відсмоктування, приплив в колонку розчин хлорофілу. Не можна брати цього розчину занадто багато, крім того, він не повинен бути занадто концентрованим. Ми побачимо, що в колонці утворюється кілька різнокольорових зон. На закінчення пропустимо через колонку ще 10-15 мл суміші бензину з бензолом в співвідношенні 4: 1. При цьому пофарбовані зони розширюються. Цей процес називається проявом хроматограми (Як колонки можна також використовувати безкранових бюретки або скляну трубку, відтягнуту в нижній частині. У місці звуження утримується шматочок вати. Корисно мати на увазі, що кращу якість поділу зазвичай виходить при заповненні колонки не сухим, а «мокрим »способом. b цьому випадку порошок адсорбенту розмішують наносять в колонку разом з розчинником (в даному досвіді - з бензином). Відсмоктувати потрібно не дуже сильно, щоб не порушувати рівномірність шару адсорбенту. Без відсмоктування якість розділення краще, але досвід займає надто багато часу. краще замість відсмоктування створювати злегка підвищений тиск, підключаючи до колонки зверху надуту камеру від волейбольного м'яча. - Прим. перев.).

Тепер ми виявимо в колонці чотири зони різного кольору. Верхня, жовто-зелена зона містить хлорофіл b, синьо-зелена зона нижче - хлорофіл а. В шарі окису алюмінію адсорбуються жовтий ксантофилл і під ним - помаранчевий каротин. Каротин знаком нам за кольором моркви, в якій він міститься Якщо колонка була заповнена тільки цукровою пудрою, то каротин не затримується і у вигляді розчину потрапляє в колбу для відсмоктування. Втім, це може статися й при такому заповненні колонки, яке було описано в нашому досвіді. Якщо стовпчик адсорбенту обережно виштовхнути з колонки скляною паличкою, то можна розрізати його на окремі зони і витягти з них різні барвники органічними розчинниками.

У 1944 р англійські хіміки запропонували ще більш простий метод хроматографії, який теж дозволяє виявити і розділити мізерно малі кількості речовин. За цим способом поділ проводиться на смужці паперу, по якій рухається досліджуваний розчин. Отримаємо самі таку паперову хроматограму.




 Жири-ПАЛИВО ДЛЯ ОРГАНІЗМУ |  виявлення жирів |  Отверждение жирів-не так вже це просто! |  БІЛОК НЕ ТІЛЬКИ В яйці |  Як розпізнати білок? |  Приготуємо суповий концентрат |  Виявлення гемінана за допомогою реакції Тейхмана |  Виявлення крові з використанням бензидина |  дія жовчі |  Виявлення холестерину в яєчному жовтку |

© 2016-2022  um.co.ua - учбові матеріали та реферати