Головна

теоретична довідка

  1.  Генетика кількісних ознак як теоретична основа вивчення генетичної схильності в МФЗ. Поняття генетичної схильності.
  2.  Дайте визначення поняття «довідка». Охарактеризуйте особливості складання та оформлення довідок особистого і службового характеру
  3.  Історична довідка
  4.  Історична довідка
  5.  Історична довідка теорії ігор
  6.  Історична довідка.
  7.  Коротка географічна довідка

до Роботі № 3

Техніка приготування препаратів

1. Приготування мазка


1) з рідкої живильного середовища 2) з щільного поживного середовища

культуру беруть петлею і краплю наносять на предметне скло наносять

безпосередньо на скло (без води) невелику краплю води, в ко

торою емульгують досліджуваний

матеріал і розподіляють по

площі близько 2 см2.

№ препарату пишуть на лицьовій стороні, а зі зворотного боку місцезнаходження мазка обводять восковим олівцем.

2. Висушування


на повітрі високо над полум'ям спиртівки

мазком догори

3. Фіксація

Мета: - прикріпити мікробів до скла

- Знезаразити патогенні мікроби

- Убиті мікроби краще фарбуються

методи


фізіческійхіміческій

- Над полум'ям спиртівки мазком - більш щадний в порівнянні

вгору (3 рази круговими рухами) з фізичним: мазок занурюють

в фіксатор (етанол, ацетон, формалін

та ін.) на певний час

4. Забарвлення

методи


простиесложние

(Орієнтовні) (диференційні)

1) забарвлюють одним барвником 1) використовують кілька краси-

анілінового ряду - основним або телей (основна і допоміжних

кислим: - кислий фуксин тільні фарби, обесцвечі-

- Еозин вающие рідини (етанол)

- Метиленовий синій - метод Грама

- Забарвлення по Нейссеру

- Генціановий фіолетовий - Гінса-Буррі

- Ожешко

2) використовуються для вивчення 2) використовуються для визначення

морфології мікроорганізмів морфології, хімічного складу,

структури мікробних клітин

Переважно для забарвлення мікроорганізмів використовують основні барвники, в яких фарбувальний іон - катіон.

Барвник наливають на поверхню мазка на певний час, потім мазок промивають доти, поки струменя води не стануть безбарвними, обережно висушують фільтрувальним папером. Якщо мазок правильно пофарбований і промитий, то поле зору абсолютно прозоро, а клітини мікробів інтенсивно пофарбовані.

Методика забарвлення по Граму:

1 етап. Використовується основна фарба генціановий фіолетовий, потім розчин Люголя. Утворюється міцне комплексне з'єднання «генціановий фіолетовий + йод». Всі мікроби фарбуються в синьо-фіолетовий колір.

2 етап. Обробка етанолом (диференціація)

одні мікробидругіе мікроби

зберігають комплекс генціановий втрачають комплекс генціановий

фіолетовий + йод, що не знебарвлюються фіолетовий + йод, знебарвлюються. Це пов'язано з тим, що: пояснюється тим, що:

- Клітинна стінка товста, - клітинна стінка бактерій тонка,

- В її склад входить багато пеп- - пептидогликана мало,

тідоглікана,

- Є тейхоевие кислоти - тейхоевих кислот немає

- За будовою клітинна стінка - структура клітинної стінки

являє собою міцне мозаїчна, пухка, тому

освіту, тому після обра- після обробки етанолом пори

лення етанолом пори клітинної залишаються колишніми, фарба

стінки звужуються і фарба не вимивається, мікроби обесцве-

вимивається. чиваются

3 етап. забарвлення фуксином


одні мікробидругіе мікроби

залишаються синьо-фіолетовими, фарбуються в червоний колір,

грампозитивні: грамнегативні:

1. Всі коки за винятком 1. Гонококки і менингококки

гонококів і менінгококів

2. Всі спороутворюючі палички 2. Більшість неспорообразующих

паличок

3. З неспорообразующих бактерій 3. Спірілли

туберкульозна і дифтерійна палички

4. Актиноміцети 4. Риккетсии

5. Гриби 5. Мікоплазми

Забарвлення за Грамом не використовується при вивченні спирохет, найпростіших і вірусів.

Суть методу забарвлення по Граму: ставлення бактерій до фарбування за Грамом визначається їх здатністю утримувати утворився в процесі забарвлення комплекс генціановий фіолетового і йоду. У грампозитивних бактерій основною речовиною клітинної стінки (до 90%) є мукопептиду-муреин (пептидогликан). У грамнегативних бактерій одношаровий муреин розташовується в глибині клітинної стінки, значно більше міститься білків і ліпідів, які разом з полісахаридами утворюють поверхневі шари у вигляді мозаїки, їх цитоплазма містить РНК і ДНК в співвідношенні 8: 1 і 1: 1 відповідно. Крім того, проникність клітинної стінки у грампозитивних бактерій менше, ніж у грамнегативних. Це пояснюється великим вмістом мукопептида в складі клітинної стінки грампозитивних бактерій і меншим діаметром пір, що сприяє утриманню утворився комплексу при обробці бактерій етиловим спиртом.

Методика забарвлення за методом Романовського-Гимзе:

Фарба Романовського-Гимзе складається з метиленовогосинього, еозину і Азура.

1. На мазок наносять робочий розчин барвника (2 краплі барвника на 1 мл дистильованої води) на 10-20 хв.

2. Препарат промивають водою і висушують на повітрі.

Трепонеми фарбуються в блідо-рожевий колір, боррелии - в фіолетовий колір, лептоспіри - в рожевий колір. Сапрофітні (непатогенні) форми фарбуються в синій колір. Морфологію спирохет вивчають також в живому стані в фазово-контрастному або темнопольному мікроскопі. Хорошим методом виявлення спірохет є сріблення по Морозову.

Методика забарвлення за методом Ціля- Нільсена:

1. На фіксований препарат - мазок нанести карболовий розчин фуксину через смужку фільтрувального паперу і підігріти до появи парів протягом 3-5 хв.

2. Зняти папір, промити мазок водою.

3. Нанести 5% розчин сірчаної кислоти або 3% розчин суміші спирту з соляної кислотою на 1-2 хв до знебарвлення.

4. Промити водою.

5. докрасіть мазок водним розчином метиленового синього протягом 3-5 хв.

6. Промити водою, висушити, микроскопировать.

Методика забарвлення за методом Ожешко:

1. На нефіксований мазок нанести 0,5% розчин соляної кислоти і підігріти на полум'я протягом 2-3 хв.

2. Кислоту злити, препарат промити водою, просушити і фіксувати над полум'ям. Потім пофарбувати за Цілем-Нільсеном. Спори бактерій набувають червоного кольору, а вегетативні форми - синій.

 




 Прийняті скорочення і умовні позначення |  У разі займання спирту вогонь гасити азбестового тканиною, рушником. |  Типи мікроскопів та принципи мікроскопії; правила роботи з мікроскопом при використанні імерсійної системи |  Морфологія грибів та методи їх вивчення |  СТУДЕНТ ПОВИНЕН МАТИ ПОДАННЯ |  Підпис викладача ___ |  Робота № 4. Хламідії; морфологія, цикл розвитку |  Робота № 6. Віруси. методи виявлення |  Хламідії. (Морфологія, життєвий цикл хламідій). |  Класифікація та морфологія прокариотов, еукаріотів і вірусів |

© um.co.ua - учбові матеріали та реферати