На головну

Робота 17. Вивчення процесу денатурації білка

  1. II. Зміни, що зазнають особистістю в міру розвитку процесу
  2. II. принципи процесу
  3. II. Робота з каналами
  4. III. Робота з функціями Бази даних
  5. III.1.1) Форми кримінального процесу.
  6. IV.3.2) Види легісакціонногопроцесу.
  7. IV.4.1) Походження і зміст формулярного процесу.

Завдання роботи:вивчити шляхи денатурації білка і виробити навички проведення реакцій осадження білка, в тому числі клінічних.

Устаткування, матеріали:яєчний білок, 5% -ний розчин ацетату свинцю, насичений розчин сульфату міді, 20% -ний розчин сульфосалициловой кислоти, концентрована азотна кислота, піпетки, пробірки, спиртівка.

Виконання роботи:

а) Осадження білка ацетатом свинцю.У пробірку наливають 10 крапель яєчного білка і додають 4 краплі 5% -ного розчину (CH3COO)2Pb. Утворюється нерозчинний у воді осад (при додаванні надлишку ацетату свинцю осад легко розчиняється).

б) Осадження білка сульфатом міді.У пробірку наливають 1 мл розчину білка і додають по краплях 2% -ний розчин сульфату міді. Випадає осад білка.

Амінокіслоти і білків здатні зв'язувати іони важких металів, тому використовується в медичній практиці як протиотрути при отруєнні солями ртуті, міді, свинцю і ін.

в) Осадження білка сульфосалициловой кислотою.У пробірку з 5 краплями розчину білка додають 2 краплі 20% -ного розчину сульфосалициловой кислоти. Випадає осад білка. Пояснити спостережуване явище. Сульфосаліцилова кислота має високу чутливість по відношенню до білка (чутливість реакції 1: 50000).

Використовується для виявлення малих кількостей білка в різних біологічних рідинах (сечі, ексудатах та ін.)

 г) Осадження білка концентрованою азотною кислотою (проба Геллера). У пробірку наливають 1 мл концентрованої азотної кислоти і обережно по стінці, злегка нахиливши пробірку, доливають рівний об'єм розчину білка так, щоб рідини не змішувалися. На межі двох рідин утворюється осад у вигляді білого кільця. При струшуванні і додаванні надлишку азотної кислоти осад не розчиняється, поступово забарвлюючись в жовтий колір. Пояснити спостережуване явище. Реакція Геллера використовується при клінічних дослідженнях сечі на білок.

 д) Осадження білка нагріванням. У 5 пробірок наливають по 5 крапель 1% -ного розчину яєчного білка.

1. У першій пробірці нейтральний розчин білка нагрівають до кипіння. Рідина мутніє, відбувається укрупнення частинок, але міцели білка несуть заряд і утримуються в підвішеному стані.

2. У другій пробірці розчин білка нагрівають до кипіння і додають 1 краплю 1% -ного розчину оцтової кислоти. Частинки білка втрачають заряд, випадає пластівчастий осад денатурованого білка.

3. У третю пробірку додають 5-10 крапель 1% -ного розчину оцтової кислоти для отримання сильнокислой реакції середовища. Білкові молекули перезаряджаються, набувають позитивний заряд, це підвищує їх стійкість і при кип'ятінні осаду не утворюється.

4. У четверту пробірку додають 2 краплі 10% -ного розчину їдкого натру, створюючи лужне середовище. При кип'ятінні рідини осаду не утворюється, оскільки в лужному середовищі заряд білка збільшується.

5. У п'яту пробірку доливають 5 крапель 1% -ного розчину оцтової кислоти і 2 краплі насиченого розчину хлориду натрію і нагрівають. Випадає пластівчастий осад, так як частинки білка втрачають заряд внаслідок взаємодії білка з разноименно зарядженими іонами хлориду натрію.




Робота 3. Деревовидні освіти | Робота 4. Зростання штучної «клітини» Траубе | Робота 5. Визначення хлоридів сечі по Мору | Робота 6. Визначення загальної жорсткості води трилонометричний методом. | Робота 7. Приготування буферних розчинів | Робота 8. Вплив розведення на рН буферного розчину | Робота 10. Потенциометрический метод визначення рН розчинів за допомогою скляного електрода | Робота 11. Поділ мінеральних солей на колонках з твердим адсорбентом | Робота 12. Радіальна розподільна хроматографія | Робота 13. Метод заміни розчинника |

© um.co.ua - учбові матеріали та реферати