загрузка...
загрузка...
На головну

Методика підрахунку еритроцитів крові в лічильної камері Горяєва.

  1. B. рО2 венозної крові
  2. D. Шунтування крові
  3. I. Дисеміноване внутрішньосудинне згортання крові (ДВС-синдром)
  4. I. Методика бухгалтерського обліку
  5. IV. Порядок підрахунку голосів
  6. А. КРОВ 43. Склад крові
  7. А. Методика розрахунку довжини ЗПС, прийнята в ВВС

Для роботи необхіднийи: скарифікатори, ватяні кульки, спирт, ефір, лічильна камера Горяєва, змішувач (меланжер) для підрахунку еритроцитів, 3% розчин натрію хлориду, мікроскоп. Об'єкт дослідження-людина.

проведення роботи: Рахункову камеру поміщають під мікроскопом і розглядають сітку Горяєва спочатку при малому, а потім при великому збільшенні. Накривають камеру покривним склом, притираючи його краю до скла камери до появи райдужних кілець Ньютона. Залишивши камеру під мікроскопом, проколюють палець раніше описаним методом. Першу виступила краплю крові з пальця стирають ватним тампоном. У другу краплю занурюють кінчик змішувача для еритроцитів, тримають його вертикально і набирають кров до позначки 0,5, стежачи, щоб в капіляр не були бульбашки повітря. Обтирають кінець капіляра фільтрувальної папером і швидко, поки кров не згорнулася, переносять його в чашку з 3% розчином натрію хлориду, продовжуючи тримати змішувач вертикально. Набирають розчин до мітки 101 (тобто розводять кров в 200 разів), після чого змішувач переводять в горизонтальне положення і кладуть на стіл.

 Для підрахунку еритроцитів беруть заповнений меланжер, затискаючи нижній кінець пальцем, знімають гумову грушу і, затиснувши обидва кінці змішувача третім і першим пальцями, протягом 1 хв перемішують кров. При цьому еритроцити зморщуються і стають помітнішими. Випускають із змішувача на вату три краплі, а четверту наносять на середню площадку камери біля краю покривного скла. Капілярними силами крапля сама втягується в покривне скло і заповнює камеру. Надлишок розчину крові стікає в жолобок. Якщо на сітку потрапило повітря або на бічних майданчиках виявився надлишок розчину, камеру слід промити дистильованою водою, висушити і заповнити знову. Заповнену камеру ставлять під мікроскоп і, якщо формені елементи розташовані рівномірно (що є показником хорошого перемішування крові), приступають до підрахунку. Вважати еритроцити краще при малому об'єктиві (х8), використовуючи при цьому окуляр х15. Підраховують число еритроцитів в п'яти великих квадратах (розділених на 16 маленьких), розташованих по діагоналі від верхнього лівого квадрата вниз направо. Підрахунок ведуть в межах маленького квадрата по рядах (від верхнього до нижнього). Щоб уникнути дворазового підрахунку клітин, що лежать на кордоні між малими квадратами, застосовують правило Єгорова: «до даного квадрату відносяться еритроцити, що лежать як всередині квадрата, так і на його лівій і верхній межах; еритроцити, що лежать на правій і нижній межах, до даного квадрату не належать ». Підрахувавши суму еритроцитів в п'яти великих квадратах (що становить 80 маленьких), знаходять середнє арифметичне число еритроцитів в одному маленькому квадраті. Знаючи, що обсяг простору камери над одним маленьким квадратом дорівнює 1/4000 мм3, Множать знайдене число на 4000. Отримують число еритроцитів в 1 мм3 розлученою крові. Помноживши на величину розведення (200), отримують кількість еритроцитів в 1 мм3 цільної крові. Таким чином, формула для обчислення кількості еритроцитів наступна: Х = (Е х 4000 х 200) / 80, де х - шукане число еритроцитів в 1 мм3 цільної крові, Е - сума еритроцитів в 80 маленьких квадратах, 80 - число маленьких квадратів, в яких зроблений підрахунок, 200- розбавлення крові. Потім отримане число еритроцитів записують в перерахунку на 1 л крові, тобто число мільйонів еритроцитів, знайдених в 1 мм3, Множать на 1012.

Оформлення результатів і їх оцінка: Записати, скільки еритроцитів міститься в 1 л досліджуваної крові. Порівняти отримані результати з нормою. У дорослих цей показник становить 5,0х1012 у чоловіків, (3,9-4,5) х1012 у жінок, (4,0-4,5) х1012 у дітей шкільного віку, (5,5-7,0) х1012 у новонароджених в перші дні життя.

Методика визначення кількості гемоглобіну за методом Салі.

Для роботи необхіднийи: скарифікатори, ватяні кульки, спирт, ефір, 4% розчин цитрату натрію, гемометр Салі, капіляр (з міткою 20 мм3), Скляна паличка і піпетка. Об'єкт дослідження-людина.

проведення роботи: Визначення кількості гемоглобіну по Салі виробляють колориметрическим способом, заснованому на такому принципі: якщо досліджуваний розчин шляхом розведення довести до забарвлення, однакову зі стандартним розчином, то концентрація розчинених речовин в обох розчинах буде однакова, а кількості речовин будуть співвідноситься як їх обсяги. Знаючи кількості речовин в стандартному розчині (16,7%, що прийнято за 100% гемоглобіну), легко обчислити його зміст в досліджуваному розчині в відносних відсотках. Гемометр Салі є штатив, задня стінка якого зроблена з матового скла. У штатив вставлені три пробірки однакового діаметра. Дві крайні зверху запаяні і містять розчин солянокислого гематина, середня - градуирована і відкрита. Вона призначена для досліджуваної крові. У середню пробірку гемометра наливають 0,1 N розчин HCL до нижньої кільцевої мітки. Потім з пальця звичайним способом набирають кров в капіляр до мітки, видаляючи надлишок шляхом прикладання фільтрувального паперу до кінчика капіляра. Видувають кров на дно середньої пробірки так, щоб верхній шар соляної кислоти залишався незафарбованих. Не виймаючи піпетки, споліскують її соляною кислотою з верхнього шару. Після цього вміст пробірки перемішують, ударяючи пальцем по її дну, і залишають стояти 5-10 хв. Цей час необхідний для повного перетворення гемоглобіну в солянокислий гематин. Потім до розчину додають по краплях дістіллірованнную воду до тих пір, поки колір отриманого розчину не буде однаковий з кольором стандартного (додавати воду, розчин перемішують скляною паличкою). Цифра, що стоїть на рівні нижнього меніска отриманого розчину, показує вміст гемоглобіну в досліджуваній крові в грам-відсотках. Можна обчислити відносний вміст гемоглобіну в досліджуваній крові, наприклад, наступним чином. Припустимо, в крові 14 г% гемоглобіну, тоді 16,7г% становить 100%, а 14,0 г% - х. Таким чином, х = 83,9%, що є показником відносного вмісту гемоглобіну.

Оформлення результатів і їх оцінка: Результати необхідно висловити процентним співвідношенням плазми і формених елементів і порівняти з загальноприйнятими нормальними значеннями. У дорослих це співвідношення становить 42-44% у жінок, 44-48% у чоловіків, 35-40% у дітей і 50-55% у новонароджених.




Міністерство охорони здоров'я України | Змістовний модуль 7. система крові | Тема 1. Загальна характеристика системи крові. Дослідження функцій та Фізико-хімічних властивостей крові. | Методика отримання крові для аналізу у людини. | Методика визначення об'ємного співвідношення формених елементів і плазми (гематокриту). | Методика дослідження буферних властивостей сироватки крові по Фриденталь. | Методика приготування мазка крові і вивчення його під мікроскопом. | Методика визначення середнього вмісту гемоголобіна в одному еритроциті (СГЕ). | Тема 3. Дослідження захисних властивостей крові. функції лейкоцитів. Поняття про імунітет, його види. | Методика підрахунку лейкоцитів крові в лічильної камері Горяєва. |

загрузка...
© um.co.ua - учбові матеріали та реферати