На головну

Біологічні властивості грибів

Царство грибів (Mycota або Fungi) Входить до складу надцарства Eucaryotae і містить численні види грибів, серед яких 150-500 видів відноситься до відділу справжніх грибів (Eumycotae), Викликаючи у людини, викликаючи різноманітні за клінічними проявами захворювання (мікози) - від легких, що мають косметичний значення, до важких системних інфекцій з ураженням різних органів, тканин і систем. Більшість патогенних для людини грибів є представниками переважно класу Deuteromycetes (Fungi imperfecti або недосконалі гриби, які не здатні розмножуватися статевим шляхом), а також класів Ascomycetes і Basidiomycetes. Виділяють 4 групи мікозів (табл. 23).

Деякі мікози зустрічаються спорадично, інші мають епідемічне поширення, треті характеризуються природною осередкових. Патогенні для людини гриби можуть бути одноклітинними і багатоклітинними, одна частина з яких здатна рости на штучних середовищах, а інша не здатна розвиватися поза організмом хворого людини.

Таблиця 23. Класифікація мікозів.

 Групи мікозів  захворювання  збудники
 Глибокі (системні мікози)  кокцідіоідний мікозГістоплазмозКріптококкозБластомікоз  Coccidioides immitisHistoplasma capsulatumCriptococcus neoformansBlastomyces dermatitidis
 Підшкірні (субкутанние) мікози  СпоротріхозХромобластомікоз (хромомікоз) Міцетома (мадуромікоз)  Sportrichum schenckiiFonsecaca pedrosaiГріби пологів Acremonium, Aspergillus і т. Д.
 епідермомікози  ЕпідермофітіяРубромікозТріхофітія Микроспория Парша (фавус)  Epidermophyton floccosumTrichophyton rubrumTrichophyton violaceum, Trichophyton mentagrophytes, Microsporum canis, Microsporum ferrugineumAchorion schoenleini
 Кератомікози (поверхневі мікози)  Різнобарвний лішайЧерний мікоз (кладоспорідіоз) Тріхоспороз (біла пьедра) Чорна пьедра  Malassezia furfurCladosporium werneskiiTrichosporon beigeliiPiedraia hortae
 опортуністичні мікози  кандидози МукорозАспергіллезПеніцілліозПневмоцістоз  Candida albicans, Candida tropicalisCandida pseudotropicalis і др.Mucor sppAspergillus sppPenicillium sppPneumocystis carinii

Розміри клітин гриба варіюють від декількох (дріжджі, дерматофіти) до десятків і сотень мікрометрів (мукорової). Гриби відносяться до примітивних еукаріот, їх клітини містять гомогенну або зернисту цитоплазму, одне або кілька кулястих ядер нуклеоламі, вакуолі, мітохондрії, апарат Гольджі і ряд включень. Постійними включеннями в клітці грибів є ліпіди, волютин, глікоген, рідше - кристали солей, органічних кислот і пігменти.

Морфологія грибів досить різноманітна (рис. 32). Найбільш часто у молодих клітин грибів зустрічається яйцеподібна форма або подовжена у вигляді трубочки або ниток розгалужені структура - міцелій. Поліморфні, грушоподібні, булавоподібні, веретеноподібні, амебовідние клітини зустрічаються в більш зрілих культурах.

Міцелій являє собою круглу ветвящуюся трубку діаметром від 1 до 10 мк, розділену поперечними перегородками на клітини довжиною 5 до 70 мкм. Гілки міцелію виникають у вигляді бічних виростів, які можуть розташовуватися у деяких грибів через правильні проміжки з тієї чи іншої сторони. Переплітаючись і анастомозируя один з одним, нитки міцелію створюють пухку або густу грибницю, щільно спаяні з поживним субстратом або ж легко від нього відділяється. На кінці ниток у ряду грибів можна спостерігати своєрідні розгалуження у вигляді рогів північного оленя, канделябрів, гребішковою органів, завитків, тонких спіралей або ж здуття, що нагадують кийок, ціпок, булаву.

У культурах дріжджоподібних грибів роду Candida замість істинного міцелію зустрічається псевдомицелий, Що складається з подовжених клітин з бічними відгалуженнями, що нагадують нитки істинного міцелію. На відміну від справжнього міцелію, псевдомицелий представлений окремими, не пов'язаними один з одним клітинами, кожна з яких має власну оболонку і замість істинного розгалуження в Псевдоміцелій є деревоподібна розташування клітин.

Найважливішим елементом грибів є спори або конідії, За допомогою яких гриби розмножуються і поширюються в зовнішньому середовищі. Зазвичай суперечки утворюються у великій кількості і виникають або всередині міцелію (ендоспори - Тканинні форми збудників кокцідіоідний микоза, ріноспорідіоза, що розвиваються у великих круглих утвореннях - сферул), або безпосередньо на міцелії, на його гілках, або на своєрідних спороносних гифах (екзоспори).

Виділяють наступні види суперечка:

· артроспори прямокутної і округлої форми, розміром 2-4х4-8 мкм, утворюються шляхом розчленування міцелію;

· бластоспори - Круглі або яйцеподібні суперечки, розміром 1,5-8 мкм, утворюються брунькуванням материнської клітини;

· хламідоспори - Округлі, великі суперечки, діаметром 15-20 мкм з вираженою шорсткою оболонкою, розташовані по ходу (інтеркаларние, проміжні) або на кінцях (термінальні, кінцеві) міцелію;

· мікроконідії (Алейроспори) округлої або грушоподібної форми розміром 2-5х3-7 мкм, розташовані купками або поодинці;

Мал. 32. Морфологія грибів. 1 - міцелій; 2 - розгалуження міцелію у вигляді рогів північного оленя; 3 - Гребешкова органи - закінчення міцелію дерматофитов; 4 - канделябри - кінцеві розгалуження міцелію; 5 - булавоподібні закінчення міцелію; 6 - закінчення міцелію у вигляді кийків; 7 - вузлуваті органи - сплетіння міцелію дерматофитов; 8 - веретеноподібні суперечки на кінцях міцелію; 9 - аскоспори; 10-спорангіоспори; 11 - артроспори; 12 - бластоспори; 13 - хламідоспори кінцеві і інтрекалярние; 14 - алейріі; 15 - макро- і мікроконідії.

· конідії (конідіоспор) круглої або яйцевидної форми з гладкою або шорсткою оболонкою, діаметром 3-5х5-8 мкм, утворюються на спеціальних конидиеносцах з боків або на кінцях міцелію і прикріплюються до нього безпосередньо або тонкою ніжкою. До Конідій також відносять великі веретеноподібні форми довжиною 6-8-40 мк, шириною 3-12 мк з поперечними перегородками (макроконідіі). У патологічному матеріалі з вогнищ ураження від хворих мікозами виявляються досить одноманітні елементи гриба (суперечки, нитки міцелію), не схожі на елементи гриба в культурах.

Культуральні ознаки деяких патогенних грибів, вирощуваних при різних температурах, можуть бути різні. Так, наприклад, збудники кокцідіоідний микоза, бластомікозів, гістоплазмозу при температурі 30-330 С і нижче дають міцеліальні форми, а при температурі 35-370 З-дріжджові форми, майже зовсім позбавлені міцелію.

Культури патогенних грибів відрізняються великою різноманітністю. Різноманітність колоній залежить від видових і вікових особливостей гриба, складу живильного середовища і умов культивування.

Діаметр колоній коливається від 0,5 до 3 см і більше, колір також варіює - поряд з безбарвними колоніями зустрічаються білувато-жовтуваті, жовті, коричневі, рожеві, червоні, зелені, помаранчеві, фіолетові, чорні. Колонії одних грибів плоскі і рівні, інших - складчасті, горбисті, зморшкуваті, в деяких випадках кратери-образні або куполовипуклие. Поверхня колоній у одних грибів гладка, шкіряста, іноді блискуче-сального відтінку, у інших пухнаста, оксамитова або борошниста. Консистенція культур теж різна: у одних шкіряста, щільна, у інших м'яка, тістоподібної, слизисто-тягуча, у деяких крошковатая. Ставлення грибів до субстрату також різне: одні глибоко впроваджуються в середу, інші легко відокремлюються від живильного середовища.

Патогенні гриби є аеробами, що використовують для свого харчування різні білки, вуглеводи, ліпіди, кератин і т. Д. Глибина розкладання поживних субстратів різна у різних грибів. Так, одні гриби розкладають білки тільки до амінокислот, інші до аміаку і сірководню. Розкладання вуглеводів одними грибами супроводжується кислотоутворенням, тоді як інші гриби розщеплюють їх до вуглекислоти і води.

Більшість патогенних грибів краще розвиваються в кислих середовищах (рН 6,0-6,5) при оптимальній температурі 28-330 З, проте вони здатні добре рости при кімнатній температурі (16-200 С) і при температурі 35-370 С. Найбільш часто для культивування грибів застосовують щільну або рідку середу Сабуро, що містить пептони і мальтозу.

Лабораторна діагностика мікозів

Матеріалом для дослідження є уражені волосся, лусочки шкіри, шматочки нігтів, шкірні та нігтьові зіскрібки, гній, мокротиння, пунктати лімфатичних вузлів, кісткового мозку, внутрішніх органів, кров, спинномозкова рідина, шлунковий сік, жовч, випорожнення, біоптати і ін. Матеріал беруть стерильними інструментами (пінцетом, скальпелем, голкою, ножицями, ложечкою Фолькмана і т. Д.); тампони для взяття матеріалу не використовуються. Патологічний матеріал обробляють сумішшю їдкого калію з діметісульфоксідом (20 г КОН + 100 мл 60% -го ДМСО). Препарати «роздавленої краплі» досліджують під великим збільшенням (х40) звичайного або фазово-контрастного мікроскопа.

У хворих микроспорией в променях люмінесцентної лампи уражені волосся мають смарагдово-зелене свічення.

Для діагностики мікозів застосовується широкий комплекс лабораторних досліджень (мікроскопічний, мікологічний, алергічний, серологічний, генетичні методи, биопроба - схема 23).

Схема 23. Лабораторні методи діагностики мікозів

мікроскопічний метод відіграє важливу роль в діагностиці мікозів, т. К. дає можливість швидко виявити в нативних і забарвлених препаратах наявність і розташування клітин, суперечка гриба і ниток міцелію в патологічному матеріалі. Найбільш часто для забарвлення грибів застосовують загальноприйняті методи Грама, Романівського-Гімза, Циля-Нільсена, Бурри. Розроблено також широкий набір спеціальних методів забарвлення грибів.

Експрес-діагностика мікозів здійснюється за допомогою прямої РИФ.

мікологічний метод(Виділення чистої культури гриба і її ідентифікація) є найважливішою складовою частиною лабораторного дослідження при мікозах. Посіви роблять на спеціальні щільні і рідкі (неселективні і селективні) поживні середовища (середовища Сабуро - мальтоза-пептонна, сусло-агар, Чапека; кукурудзяний, рисовий, картопляний, кров'яної, шоколадний, серцево-мозкової, вугільно-дріжджовий агар і т. Д .). Селективні середовища містять антибіотики (левоміцетин, стрептоміцин, пеніцилін та ін.), Барвники (бенгальський рожевий і ін.) Або дезинфікуючі речовини. На відміну від слаболужних середовищ для вирощування більшості бактерій, середовища для культивування грибів мають кислу або слабокислу рН (5,7-6,8).

Для первинної диференціації грибів розроблений агар CHROM з хромогенного субстратами, що розщеплюються ферментами грибів з утворенням забарвлених сполук, в результаті чого колонії різних видів грибів забарвлюються в різні кольори - червоний, жовтий, білий, кремовий, коричневий, чорний і т. Д.

Культивування грибів здійснюють зазвичай при температурі 22-280 З протягом 2-4 тижнів. Ідентифікацію виділеної культури гриба проводять на підставі характеристики колоній (зовнішній вигляд, форма, консистенція, колір), мікроскопічної будови гриба (будова міцелію, форма і розташування конидиеносцев і конідій - суперечка), а також за біохімічними та іншими ознаками.

серологічний метод- Визначення антитіл до грибів або їх антигенів в сироватці крові хворих на мікози за допомогою РА, РСК, РНГА, РІФ, ІФА, иммуноблотинга

Алергічний метод -постановка внутрішньошкірних алергічних проб. Проводять з грибковими алергенами, які представляють собою суспензії з убитих грибів, фільтрати знешкоджених нагріванням культур, полісахаридні і білкові фракції клітин гриба. Результати алергічних проб враховують через 20 хв (негайні) і через 24-48 год (уповільнені реакції).

Для виявлення грибкової сенсибілізації організму також застосовують імунологічні тести in vitro (Дегрануляция базофілів як тест гіперчутливості негайного типу, а для виявлення гіперчутливості уповільненої типу - реакцію гальмування міграції лейкоцитів або бласттрансформации лімфоцитів).

біопроба-зараженіе чутливих тварин (миші, щури, хом'яки, кролики, морські свинки, собаки, кішки) різними способами (накожно, під шкіру, підшкірно, внутрішньом'язово, внутрішньочеревно, внутрішньовенно, внутрисердечно, интрацеребрально, перорально, интратрахеально) для виділення чистої культури гриба.

гістологічний методспрямована виявлення гриба в тканинах, отриманих при біопсії і аутопсії.

Генодіагностика.Розроблено ПЛР для виявлення в матеріалі від хворого специфічних фрагментів ДНК грибів, що дозволяє виявити близько 40 видів грибів, в тому числі Candida albicans і її варіанти, Т. rubrum и С. neoformans, різні види Aspergillus, Збудників паракокцидіоїдомікоз (Paracoccidioides brasiliensis) і гістоплазмозу (Histoplasma capsulatum).



Вірусологічна діагностика філовірусних інфекцій (Марбурзька лихоманка і лихоманка Ебола) | Кріптокккоз

Лабораторна діагностика поліомієліту | гепатит В | інші гепатити | Лабораторна діагностика вірусних гепатитів | Арбовірусние інфекції | Самостійна робота студентів | сказ | Лабораторна діагностика ВІЛ-інфекції | Вірусологічна діагностика ПАРВОВІРУСНИЙ інфекцій | Вірусологічна діагностика аренавірусних інфекцій |

© um.co.ua - учбові матеріали та реферати