На головну

Серологічний метод діагностики вірусних інфекцій

Заснований на визначенні в крові хворого противірусних антитіл в серологічних реакціях з використанням специфічних вірусних антигенів - діагностикумів або спеціальних тест-систем. Серологічні реакції при вірусних інфекціях ставлять в рідкому середовищі (РСК, РГГА, РНГА, Ронг, РТОНГА, РІА), в гелі (РПГ, РРГ, РВІЕФ) або на твердофазном носії (наприклад, на стінках лунки полістиролового планшета з фіксацією на них одного з компонентів імунної реакції - антигену або антитіла). Відомі такі твердофазні методи як ІФА, ІЕМ, РГадсТО, РІФ, РГадс, РТГадс.

Нерідко, внаслідок наявності в крові більшості здорових людей природних противірусних антитіл, серологічна діагностика вірусних інфекцій грунтується на дослідженні парних сироваток, взятих на початку і в розпалі хвороби або в періоді реконвалесценції з метою визначення наростання титру антитіл. Діагностично значущим вважається наростання титру антитіл в чотири рази і більше.

Підвищення чутливості серологічних методів досягається адсорбцією антигенів або антитіл на еритроцитах (РНГА, Ронг, РТОНГА, РГадсТО, РРГ), міткою ферментами (ІФА), радіоактивними ізотопами (РІА, РПГ) або флюорохромами (РІФ), Використовується також принцип лізису еритроцитів (як індикаторного системи) при взаємодії антигенів і антитіл в присутності комплементу (РСК, РРГ).

Реакція зв'язування комплементу (РСК) у вигляді варіанту зв'язування комплементу на холоді (протягом ночі при температурі +40 С) часто застосовується в вірусології для ретроспективної діагностики ряду вірусних інфекцій і для визначення вірус-специфічних антигенів в матеріалах від хворих.

Реакція радіального гемолізу (РРГ) в агарозному гелі заснована на явищі гемолізу еритроцитів, сенсибілізованих антигеном, під впливом вирусспецифических антитіл в присутності комплементу і застосовується для серологічної діагностики грипу, ГРВІ, краснухи, паротиту, тогавірусних інфекцій.

Для постановки реакції до баранячим еритроцитів (0,3 мл 10% -й суспензії) додають 0,1 мл нерозведеного вірусного антигену і суміш витримують 10 хв при кімнатній температурі. До 1,2% агарозе при температурі 420 З додають 0,3 мл сенсибілізованих еритроцитів і 0,1 мл комплементу, суміш розливають на предметні скельця або в лунки полістиролових планшетів, в застиглому гелі агарози за допомогою пробійника вирізують отвори і заповнюють їх досліджуваними та контрольної сироватками. Скло або панелі закривають кришкою і поміщають їх у вологій камері на 16-18 годин в термостат. Облік реакції здійснюють по діаметру зони гемолізу навколо отворів, заповнених сироваткою. У контролі гемоліз відсутній.



індикація вірусів | Самостійна робота студентів

Лабораторна діагностика бактеріального вагінозу | Лабораторна діагностика рикетсіозів | Лабораторна діагностика епідемічного висипного тифу. | Лабораторна діагностика Ку-лихоманка. | Лабораторна діагностика ерліхіозом | Лабораторна діагностика бартонеллезов | Самостійна робота студентів | Виділення вірусів на культурах клітин | Експрес-діагностика вірусних інфекцій | Вивчення морфології вірусів по електронограмі. |

© um.co.ua - учбові матеріали та реферати