На головну

Лабораторна діагностика сифілісу

Збудником сифілісу - хронічної інфекції зі специфічним ураженням шкіри, внутрішніх органів і нервової системи, є бліда трепонема (Treponema palladium). Методи лабораторної діагностики цієї інфекції залежать від її стадії.

Матеріалом для мікроскопічного дослідження при сифілісі є виділення твердогошанкра, пунктат лімфатичних вузлів, виділення слизових оболонок і шкіри при вторинному сифілісі, а також сироватка крові і спинномозкова рідина для серологічної діагностики. Методи мікробіологічної діагностики сифілісу представлені в схемі 17.

мікроскопічний метод(Темнопольная мікроскопія з високою роздільною здатністю) зазвичай застосовується при первинному сифілісі при дослідженні виділень твердогошанкра. Бліда трепонема має 8-12 рівномірних дрібних завитків правильної форми, має характерний плавним штопорообразно вращательно-поступальним, маятникоподібними, згинальні і контрактільних рухом. На статевих органах зустрічаються непатогенні Treponema refringens и Treponema balantidis, а в порожнині рота Treponema microdentium и Treponema buccalis, Які необхідно диференціювати за морфологічними властивостями від блідої трепонеми. В силу цих обставин темнопольной мікроскопія бажано піддати пунктат регіонарних лімфатичних вузлів. Застосовується також диференціація Treponema palladium від непатогенних трепонем методом люмінесцентної мікроскопії з моноклональними або поліклональних антитіл, який є одночасно експрес-методом діагностики сифілісу (рис. 24).

Схема 17.Методи мікробіологічної діагностики сифілісу


Мал. 24. Бліда спірохета (Treponema palladum). Пряма РИФ. х900

Методи забарвлення блідої спірохети (за Романовським-Гімзою, при якому вона забарвлюється в блідо-рожевий колір, імпрегнацією сріблом по Морозову), а також метод Буррі (виготовлення негативних препаратів в краплі туші) з подальшим дослідженням препаратів в звичайному світловому мікроскопі мають низьку відтворюваність і істотно поступаються темнопольной мікроскопії за ступенем роздільної здатності, тому в реальній практиці ці методи не застосовуються.

бактеріологічний метод діагностики сифілісу не застосовується у зв'язку з труднощами культивування блідих трепонем і відсутністю ефективних поживних середовищ.

серологічний метод. Рекомендується використання таких методів серодиагностики сифілісу, спрямованих на виявлення в крові хворих специфічних антитіл до бліда трепонема:

· Для проведення відбіркових досліджень на сифіліс ставлять неспецифічний тест - мікрореакцію преципитации (МР). У лунку полистироловой пластини вносять 3 краплі досліджуваної сироватки і 1 краплю кардіоліпінового антигену, суміш струшують і враховують результати. Позитивна реакція характеризується випаданням пластівців. МР має високу чутливість і специфічність, добре поєднується з підтверджуючими діагноз специфічними трепонемную тестами, дозволяє об'єктивно оцінити ефективність лікування, однак необхідно її підтвердження одним із специфічних тестів (ІФА, РНГА, РІФ, РІБТ, РСК).

· ІФА застосовується як для відбіркових цілей, так і для діагностики сифілісу. Розроблено тест-системи для визначення антитіл до блідої спірохети класів G і M, що має важливе значення для діагностики ранніх форм сифілісу (в тому числі вродженого), диференціальної діагностики рецидивів, реінфекції, оцінки ефективності лікування і т.д.

· РНГА також використовується для цілей відбору і діагностики. Має більш високу чутливість і специфічність, ніж інші серологічні реакції при сифілісі, відрізняється простотою в постановці.

· РИФ порівнянна за своїми наслідками з ІФА і РНГА. Сироватку хворого адсорбируют суспензією непатогенних трепонем або розводять 1: 200, наносять на предметне скло, що містить фіксовані ацетоном блідітрепонеми з тестикул зараженого кролика, після чого на препарат наносять люминесцирующий імуноглобулін кролика проти глобулінів людини. Мазки досліджують за допомогою люмінесцентного мікроскопа, відзначаючи при позитивному результаті наявність яскраво-зеленого світіння трепонем.

· ІБТ. Суть реакції полягає в здатності антитіл до бліда трепонема иммобилизировать (паралізувати) їх в присутності комплементу. Підраховують відсоток іммобілізації, при цьому при показнику 0-20% реакція вважається негативною, від 21 до 50% - слабо позитивної, від 51 до 100% - позитивною.

· РСК ставиться за загальноприйнятою методикою з неспецифічним кардіоліпіновим (екстракт ліпідних фракцій з бичачого серця - реакція Вассермана) і специфічним (із зруйнованих ультразвуком трепонем) антигенами. Позитивна реакція характеризується затримкою гемолізу.

· Иммуноблотинга - варіант ІФА для визначення антитіл в крові хворого до антигенів блідої спірохети.

В даний час ставиться питання про повсюдне введення більш інформативних, простих і економічних ІФА і РНГА для діагностики сифілісу з одночасним скасуванням РСК і ІБТ.

Генодіагностика.Розроблено ПЛР і метод ДНК-зондів для діагностики сифілісу.



Лабораторна діагностика актиномікозу | Серологічна діагностика сифілісу.

Самостійна робота студентів | Лабораторна діагностика дифтерії | Самостійна робота студентів | Лабораторна діагностика кашлюку і паракашлюку | Самостійна робота студентів | Лабораторна діагностика гемофільної інфекції | І ГОСТРИХ РЕСПІРАТОРНИХ ЗАХВОРЮВАНЬ (ГРЗ) | Лабораторна діагностика туберкульозу та микобактериозов | Лабораторна діагностика прокази | Схема 16. Лабораторна діагностика менінгококової інфекції |

© um.co.ua - учбові матеріали та реферати