Головна

І ГОСТРИХ РЕСПІРАТОРНИХ ЗАХВОРЮВАНЬ (ГРЗ)

Основним збудником (близько 60%) бактеріальних пневмоній в даний час є пневмокок (Streptococcus pneumoniae), Рідше (30-40%) - клебсієли (Klebsiella pneumoniae), хламідії (Chlamydophila pneumoniae), мікоплазми (Mycoplasmapneumoniae), стафілокок (Staphylococcus aureus), Гемофільні палички (Haemophilus influenzae), легіонелли (Legionella pneumophila).

Підходи до лабораторної діагностики бактеріальних пневмоній і ГРЗ, незалежно від виду збудника, принципово, однакові.

Матеріалом для дослідження є мокротиння, виділення слизової оболонки трахеї і бронхів, промивні води бронхів, ексудат з плевральної порожнини, кров, спинномозкова рідина при менінгіті, виділення зіву і носа при ГРЗ.

мікроскопічний метод (Мікроскопія мазків з досліджуваного матеріалу, забарвлених по Граму) має орієнтовне значення. Наявність в препаратах значної кількості подовжених ланцетовідних, грампозитивних диплококков, оточених капсулою (Streptococcus pneumoniae - Мал. 19), Скупчень коків у вигляді грон (S.aureus)або грамнегативних коккобактеріямі (H.influenzae) дозволяє поставити попередній діагноз бактеріальної пневмонії і служити орієнтиром для призначення антибактеріальної терапії.

Мал. 19. Пневмококк(Streptococcus pneumoniae). Забарвлення по Граму. х 900

бактеріологічне дослідженняє провідним методом діагностики пневмоній і ГРЗ бактеріальної етіології, яке дає можливість не тільки виділити збудника інфекції, але і визначити його чутливість до антибіотиків.

Для виділення пневмокока (Streptococcus pneumoniae) здійснюють посів досліджуваного матеріалу на МПБ з глюкозою і на кров'яний МПА. Посіви вирощують в термостаті при 370 З протягом доби. Виросли на кров'яному МПА ніжні колонії оточені зеленою зоною гемолізу. З колоній готують мазок, вивчають морфологічні і тинкторіальні властивості, після чого залишок колонії пересівають на скошений кров'яний МПА або цукровий (або сироватковий) МПБ з метою виділення чистої культури та її ідентифікації на підставі комплексу біологічних властивостей.

диференціація S.pneumoniae и S.pyogenes грунтується на перевірці чутливості виділеної культури до жовчі і оптохіну, а також здатності ферментувати інулін.

Серотіпірованіе пневмокока проводиться за допомогою РА на склі з використанням типоспецифічних пневмококових сироваток (відомо близько 90 сероварів пневмокока, з яких 23 грають важливу роль в патології людини). Для серотипування пневмококів може використовуватися реакція Нейфельд (феномен набухання капсули стрептокока в присутності типоспецифічними сироватки).

Для ізоляції клебсієл виконують посів досліджуваного матеріалу на МПА з пеніциліном (для придушення супутньої мікрофори) в чашках Петрі або на диференційно-діагностичні середовища з лактозою і індикатором бром-тимоловим синім, на яких через добу культивування при 370 З утворюються блискучі опуклі слизові колонії (на диференційно-діагностичної середовищі колонії мають жовтий колір в результаті розкладання лактози). На 2 день колонії досліджують візуально і за допомогою мікроскопічного методу (забарвлення по Граму і Гінсу-Буррі для виявлення капсул), після чого пересівають типові колонії на середу Ресселя або скошений МПА для виділення чистої культури збудника. На 3 день враховують зростання на зазначених середовищах (фарбування стовпчика і скошеної частини середовища Ресселя в жовтий колір з розривами агару в результаті розщеплення глюкози і лактози з утворенням газу) і проводять ідентифікацію культури клебсієл за основними біологічними властивостями (освіта капсули, відсутність рухливості, біохімічні та антигенні властивості).

Для виділення мікоплазм проводять посів на спеціальні живильні середовища з додаванням сироватки, на яких вони не раніше ніж через місяць після утворюють характерні мікроскопічні колонії з рівними краями і зернистою структурою. Виділену чисту культуру мікоплазм ідентифікують по біохімічними та антигенними властивостями.

Виділення легіонел, які є повільно зростаючими мікроорганізмами, здійснюють із застосуванням селективних поживних середовищ складного складу, що містять дріжджовий екстракт і інші фактори росту, а також різні антибіотики для придушення росту супутньої мікрофлори. Легіонели відносяться до повільно зростаючим мікроорганізмам, проте мікроколонії, видимі під мікроскопом, з'являються на 2-у добу росту, тоді як макроскопічно видимі дрібні колонії (2-4 мм) правильної округлої форми, з рівними краями і блискучою поверхнею з характерним рожевим або синьо зеленим обідком і опалесціюючий центром - через 3-5 доби. Ідентифікацію виділеної чистої культури до рівня роду проводять на підставі вивчення біологічних властивостей. Для видової ідентифікації розроблені ІФМ, газорідинна хроматографія, генодіагностика (рестрикційний аналіз, метод ДНК-зондів).

серологічний метод діагностики пневмоній, викликаних пневмококами, мікоплазмами, хламідіями і легіонел при дослідженні парних сироваток крові хворих (в гострому періоді і в стадію реконвалесценції) за допомогою РСК, РНГА, ІФА не є клінічно обов'язковим і має епідеміологічне значення. Для визначення антитіл до легіонелли використовують, крім того, непрямий ІФМ з антигеном з легіонел (діагностичний титр 1:32 і більше).

Експрес-методи. Розроблено імуноферментний тест для визначення в сечі специфічного антигену легіонел, а також імунохроматографічним тест для виявлення в сечі пневмококової антигену, проте широке застосування цих методів обмежено.

генодіагностика. Запропоновано ПЛР для діагностики хламидиозов і мікоплазмозів, однак метод широко в клінічній практиці не використовується.

Біопроба.Ісследуемийматеріал для виділення пневмококів вводять внутрішньочеревно білим мишам або морським свинкам. Культуру пневмокока виділяють з крові і органів загиблого або забитої тварини, а також проводять бактеріоскопію мазків-відбитків, зроблених з його органів. В даний час метод практично не застосовується.



Лабораторна діагностика гемофільної інфекції | Лабораторна діагностика туберкульозу та микобактериозов

Лабораторна діагностика геликобактериоза | Лабораторна діагностика бактеріальної дизентерії. | Самостійна робота студентів | Лабораторна діагностика холери | Лабораторна діагностика ботулізму | Самостійна робота студентів | Лабораторна діагностика дифтерії | Самостійна робота студентів | Лабораторна діагностика кашлюку і паракашлюку | Самостійна робота студентів |

© um.co.ua - учбові матеріали та реферати