Головна

Лабораторна діагностика гемофільної інфекції

Збудник гемофільної інфекції- Haemophilus influenzae, здатний викликати гнійний менінгіт, гостре запалення верхніх дихальних шляхів, бронхіт, пневмонію, емпіему, кон'юнктивіт, отит та інші опортуністичні захворювання. Рівень носійства гемофільної палички серед здорових осіб високий (до 90%). Гемофільна інфекція у дітей у віці до 3 років протікає виключно важко, особливо в разі виникнення гострого епіглотиту (запалення надгортанника).

бактериоскопический методможе бути використаний при дослідженні спинномозкової рідини при підозрі на гнійний менінгіт (рис.18).


а б

Мал. 18. Гемофільна паличка - Haemophilus influenzae. а -мазок з спинно-мозкової рідини, б - Мазок з чистої культури. Забарвлення по Граму. дрібні грамнегативні палички. х900

бактеріологічний методє основним в лабораторній діагностиці гемофільної інфекції. досліджуваний матеріал (мокрота, кров, спинномозкова рідина, серозну рідину) засівають на МПА з 6 - 10% нативної крові або на «шоколадний» агар з прогрітій або кип'яченої кров'ю. Якщо можливості негайно посіяти матеріал на середовища немає, використовують транспортну напіврідку середу з активованим вугіллям і ніацином.

Серозну і спинномозкову рідини центрифугируют, осад засівають бактеріальної петлею на шоколадний агар (МПА з 5% дефибринированной крові людини, коня або кролика витримують 2-3 хвилини при температурі 800 С, повторно додають 5% крові і знову витримують при тій же температурі 2-3 хвилини) або середу Філдса (МПА з додаванням пептического переварити крові коня або барана). Паралельно роблять посів на звичайний МПА, на якому гемофільна паличка не росте.

колонії Haemophilus influenzae дрібні, прозорі або напівпрозорі, виростають через 18-24 години; в мазках з цих колоній виявляються дрібні капсулообразующие або капсулонеобразующіе грамнегативні палички (рис. 17б). Частину колонії пересівають на скошений шоколадний МПА для виділення чистої культури. Ідентифікацію гемофільних бактерій проводять на підставі вивчення біохімічних (каталазная, Оксидазний активність, ферментація вуглеводів, гемолітична активність, поживні потреби) і антигенних (постановка РА на склі з груповими сироватками а, b, с, d, e, f до капсульних антигену) властивостей.

для ідентифікації Haemophilus influenzae застосовують також тест сателітних колоній, для чого на поверхню шоколадного МПА наносять досліджувану культуру і в деякі ділянки середовища - штам Staphylococcus aureus. Гемофільна паличка виростає у вигляді дрібних сателітних колоній, що оточують колонії S. aureus, Так як стафілокок, гемолізіруя кров, вивільняє X і V чинники - стимулятори росту Haemophilus influenzae.

Каталазу гемофільної палички визначають по піноутворення в краплі 10% перекису водню на предметному склі при внесенні в неї досліджуваної культури. Оксидазу виявляють шляхом нанесення на диск фільтрувального паперу, діаметром 5-7 см, 2-3 крапель 1% розчину тетраметілпарафенілендіаміна і досліджуваної культури, в результаті чого через

10-15 сек. з'являється фіолетове забарвлення. Уреазу визначають загальноприйнятим методом з розкладання сечовини з утворенням лужних продуктів в присутності індикатора фенолового червоного; при наявності уреази середу набуває яскраво-малиновий колір. Порфіриновий тествиявляет здатність Н. influence до синтезу ?-амінолевуленовой кислоти (АЛК) - потреби в факторі X. При внесенні АЛК в середу тільки АЛК-незалежні гемофільні бактерії синтезують і секретують порфобилиноген і порфірини (проміжні сполуки біосинтезу гема), тоді як АЛК-залежні гемофільні палички, які потребують факторі X, не здатні до утворення зазначених продуктів. Досліджувані бактерії засівають на шоколадний МПА, наносять на поверхню середовища диски, просочені АЛК, і після 24-годинної вирощування в термостаті при 370 З опромінюють УФ-променями. При наявності Х-незалежних мікроорганізмів спостерігають цегляно-червоне флюоресценцію.

Для специфічної профілактики гемофільної інфекції в Росії ліцензована полисахаридная вакцина, кон'юговані з правцевим анатоксином (вакцина Act-HIB) фірми Пастер Мерье Коннот, яка не містить консервантів і антибіотиків.



Самостійна робота студентів | І ГОСТРИХ РЕСПІРАТОРНИХ ЗАХВОРЮВАНЬ (ГРЗ)

Лабораторна діагностика кампилобактериозе | Лабораторна діагностика геликобактериоза | Лабораторна діагностика бактеріальної дизентерії. | Самостійна робота студентів | Лабораторна діагностика холери | Лабораторна діагностика ботулізму | Самостійна робота студентів | Лабораторна діагностика дифтерії | Самостійна робота студентів | Лабораторна діагностика кашлюку і паракашлюку |

© um.co.ua - учбові матеріали та реферати