На головну

Лабораторна діагностика кампилобактериозе

Збудниками кампилобактериозе - кишкових інфекцій, схильних до генералізації і вираженим токсико-алергічний ускладнень, є Campylobacter jejuni и Campylobacter coli. Опортуністичні інфекції різної локалізації та тяжкості викликаються переважно Campylobacter fetus.

Матеріалом для дослідження в залежності від характеру захворювання є випорожнення, гній, ліквор, кров, блювотні маси і ін., Які з урахуванням нестійкості збудника у зовнішньому середовищі повинні бути доставлені в лабораторію якомога швидше.

бактериоскопический методє вельми чутливим зважаючи характерною морфології кампілобактеров (грамнегативні зігнуті, S-образні або покручені палички розміром 0,2 0,9x0,5-5,0 мкм).

Бактеріологічний метод.Для виділення чистих культур досліджуваний матеріал засівають на селективні щільні середовища (з кров'ю, факторами росту і антибіотиками) або використовують для виділення метод фільтрації. Неконтамінірованний матеріал засівають на неселективні середовища збагачення (бруцеллезние бульйон або агар, що містить пептони, дріжджовий екстракт, глюкозу і гідросульфіт натрію в якості редуцентам).

Селективні середовища (Скірроу, Престона, Еритреї-агар) для кампілобактеров містять баранячу кров (фактор росту) і селективні добавки (антибіотики триметоприм, ванкоміцин, амфотерицин Д, поліміксин В і цефалотин), інгібуючі зростання нормальної мікрофлори. Культивування кампілобактеров здійснюється в спеціальній газовій атмосфері, що складається з азоту, вуглекислого газу і кисню в співвідношенні 85: 10: 5, яка створюється застосуванням спеціальних газогенераторних пакетів, які розміщені разом з посівами в герметично закриваються ємності. Посіви інкубують при 420 С.

метод фільтрації заснований на здатності рухомих кампілобактеров активно проходити через мембранні фільтри з порами діаметром 0,45 - 0,65 мкм. Фільтр укладають на поверхню неселективной щільною середовища в чашці Петрі, наносять на нього 10-15 крапель суспензії фекалій, інкубують чашку при 370 З протягом 1 год, після чого фільтр знімають, а чашку інкубують в мікроаерофільних умовах. Проникли через фільтр кампілобактери утворюють через 48 - 96 год на поверхні середовища характерні колонії - сірі, плоскі, з нерівним краєм, зливаються по ходу штрихів. На більш сухих середовищах колонії опуклі, блискучі, округлі, без вираженої тенденції до поширення; гемоліз відсутній.

Виділені культури ідентифікують за морфологією (мазки, пофарбовані по Граму), характерною «гвинтоподібної» рухливості (дослідження в препараті «роздавлена ??крапля з використанням темнопольной або фазово-контрастної мікроскопії), біохімічними властивостями та чутливості до антибіотиків. Основні властивості деяких видів кампілобактеров і Helicobacter pylori представлені в таблиці 12. Важливою ознакою С. jejuni є гідроліз гіппурат натрію (в 0,4 мл 1% водного розчину гіппурат суспендують петлю виділеної культури, пробірку поміщають на 2 години в термостат при 370 С, після чого додають 0,2 мл 3,5% розчину нингидрина в ацетон-бутаноловой суміші і знову поміщають в термостат). Пурпурне забарвлення суспензії свідчить про позитивна пробі. Культура з типовою морфологією, що виросла при 42 ° С на селективної середовищі, позитивними пробами на оксидазу і на гідроліз гіппурат, відноситься до виду С. jejuni.

Нітратний тест культуру виконують на нітратний бульйоні Барретта або напіврідкої середовищі Мюллера-Хинтона з 0,2% нітрату калію; тест-реактивом є сульфоновая кислота в суміші з нафтиламином. Позитивний нітратний тест характеризується появою червоного забарвлення.

Таблиця 12.Диференціація деяких видів кампілобактеров і Helicobacter pylori

 біологічні властивості Campylobacter jejuni Campylobacter coli Campylobacter fetus Helicobacter pylori
 Зростання при 420 С + + - -
 Зростання при 250 С - - + -
 уреаза - - - +
 нитратредуктаза + + + -
 Гідроліз гіппурат натрію + - - -
 каталаза + + + +
 Стійкість до:        
 налідиксової кислоти ± - ± +
 цефалотину + + - +

Позначення: (+) - наявність властивості, (-) - відсутність властивості, (±) - непостійне властивість

генодіагностика. Для діагностики кампілобактеріозу запропонована ПЛР.

серологічна діагностика при кампилобактериозе не проводиться через наявність у кампілобактера групових антигенів і виникнення внаслідок цього перехресних реакцій антитіл проти цього мікроорганізму з іншими мікробами.



Лабораторна діагностика иерсиниозов | Лабораторна діагностика геликобактериоза

Лабораторна діагностика лептоспірозу | Лабораторна діагностика боррелиозов (поворотні тифи, хвороба Лайма) | Лабораторна діагностика лістеріозу | Педіатричні аспекти теми | Ознайомитися зі схемою лабораторної діагностики черевного тифу і паратифів | Вивчити основні етапи бактеріологічного методу дослідження черевного тифу. | Серологічний метод діагностики тифо-паратіфозних захворювань. | Лабораторна діагностика сальмонельозів | Лабораторна діагностика ешеріхіозов | Самостійна робота студентів |

© um.co.ua - учбові матеріали та реферати