На головну

Лабораторна діагностика туляремії

Резервуаром збудника туляремії (Francisella tularensis) Є гризуни, людина заражається від них усіма відомими способами (при прямому і непрямому контакті, аліментарним, аерогенним, трансмісивним шляхом). За клінічними проявами тулерямія нагадує чуму, однак летальність при цій інфекції не висока (1-2%). Виділяють виразково-железистую (бубонну), очі-бубонна, ангінозний-буббонную, кишкову і легеневу форми туляремії.

Методи мікробіологічної діагностики туляремії відображені в схемі 5. Для лабораторної діагностики туляремії широко використовуються імунологічні методи (серологічна діагностика, алергічні проби), що здійснюються в звичайних клінічних умовах. Біопроб з виділенням чистої культури збудника проводяться в спеціалізованих лабораторіях особливо-небезпечних інфекцій.

Серологічний метод.У сироватці крові хворих специфічні антитіла з'являються з 10-12 дня хвороби. У діагностичних цілях використовують розгорнуту РА (діагностичний титр 1: 100 і вище), РНГА (діагностичний титр 1: 1280 і вище), ІФА.

Алергічна проба.Випускається 2 види алергену- тулярінадля постановки відповідно нашкірної і внутрішньошкірної алергічної проби - раннього (позитивна реакція ГЗТ з 5 дня хвороби) і специфічного методу діагностики туляремії. Наявність інфільтрату і гіперемії діаметром 1 см і більше через 24-48 годин після введення туляріна розцінюється як позитивна реакція.

Біологічний і бактеріологічний методи. Виділити культури збудника від хворого шляхом безпосереднього посіву матеріалу на живильні середовища не вдається. Для виділення чистої культури збудника туляремії застосовується биопроба. З цією метою досліджуваний матеріал (див. Схему 5) вводять мишам або морським свинкам підшкірно, нашкірному, внутрибрюшинно і / або через рот. Якщо експериментальні тварини протягом 7-15 днів не гинуть, їх умертвляють і трупи піддають бактеріоскопічного і бактеріологічного дослідження. Для цього готують мазки-відбитки з внутрішніх органів і забарвлюють їх за Романовським-Гімзою. Збудник туляремії - дрібні (0,2-0,7 мкм) кокковидной і паличкоподібні бактерії, які містяться в мазках-відбитках з органів внутрішньоклітинно і у вигляді скупчень з утворенням ніжної капсули (рис. 8). Застосовують також методи експрес діагностики (виявлення збудника в матеріалі за допомогою ІФМ і ІФА). Паралельно з мікроскопічним дослідженням кров, кістковий мозок, ділянки внутрішніх органів і лімфатичних вузлів трупа тварини засівають на одну з щільних поживних середовищ (желточная середовище, середовище Маккоя, глюкозо-цистиновий агар з кролячої кров'ю і антибіотиками), яку культивують при 370 С. Зростання туляремийного мікроба в вигляді ніжних дрібних колоній (рис. 10) з'являється на 3-5-20 день, іноді пізніше. Збудник туляремії добре розмножується також в желточном мішку 12-денного курячого ембріона.

Виділену чисту культуру ідентифікують за морфологічними, антигенними (РА з туляремійной агглютинируют сироваткою) і біологічними властивостями, визначають її чутливість до антибіотиків. У біохімічному відношенні збудник туляремії мало активний (ферментація глюкози, продукція сірководню).

Схема 5. Лабораторна діагностика туляремії

 Матеріал: кров, пунктат з бубону, зішкріб з виразки, виділення кон'юнктиви, наліт із зіву, харкотиння та ін., Органи полеглих і хворих тварин, переносники (ґедзі, кліщі, комарі), об'єкти зовнішнього середовища (вода, харчові продукти, повітря) .

 

 


 


 Генодіагностика. ПЛР

 

 



а б

Мал. 9. Збудник туляремії(Francisella tularensis) в мазках з чистої культури (а) і в мазках-відбитках органів білої миші (б), яка загинула в результаті біопроб. х630.

Мал. 10. Колонії збудника туляремії на глюкозо-цістеінового агарі. х56

Генодіагностика.Для виявлення ДНК збудника туляремії розроблена ПЛР.



Лабораторна діагностика чуми. | Лабораторна діагностика сибірки

досліджень | Лабораторна діагностика стафілококових інфекцій | Самостійна робота студентів | Лабораторна діагностика стрептококових інфекцій. | Самостійна робота студентів | Умовно-патогенними грамнегативними аеробними мікроорганізмами. | Лабораторна діагностика анаеробної інфекції. | Самостійна робота студентів. | Лабораторна діагностика правця. | Самостійна робота студентів. |

© um.co.ua - учбові матеріали та реферати