На головну

Самостійна робота студентів

1. Імуноферментний аналіз (ІФА - демонстрація).Антигени вірусу імунодефіциту людини (ВІЛ) адсорбовані на дні лунок полістиролових пластини. В лунки внесені досліджувані зразки сироваток крові. Контролі: 1 - еталонна сироватка з антитілами проти ВІЛ (позитивний контроль), 2 - сироватка, яка містить антитіл ВІЛ (негативний контроль). Реакція проходить при 370 З протягом I години. Після відмивання в усі лунки вносять сироватку проти імуноглобулінів людини, мічену ферментом (пероксидаза хрону), витримують 1 годину при 370, Після чого знову відмивають. У всі лунки вносять перекис водню, яка розщеплюється пероксидазой і індикатор (ортофенілендіамін), що змінює свій колір в результаті хімічної реакції. Облік реакції проводять на спеціальному (вертикальному) спектрофотометре. Позитивний контроль характеризується фарбуванням середовища в лунці в червоно-коричневий колір, так як в еталонної сироватці містилися антитіла до ВІЛ, які вступили в реакцію з антигенами, адсорбованими на дні лунки пластини. При додаванні міченої пероксидазой сироватки проти імуноглобулінів людини антитіла міченої сироватки з'єднуються з антитілами еталонної сироватки і після другої відмивання також залишаються в лунці. Тому в лунці контролю 1 сталася виражена хімічна реакція. Контроль 2 - безбарвний, так як в сироватці, внесеної в цю лунку, які не містилися антитіла до ВІЛ вірусу, тому в цій лунці не відбулося кольорової реакції з сироваткою проти імуноглобулінів людини, міченої пероксидазой. Інтенсивність забарвлення в досвідченої лунці залежить від рівня антитіл до ВІЛ в досліджуваній сироватці,

2. Радіоімунного аналіз (РІА - демонстрація). Сутність РІА подібна до ІФА, проте сироватку проти імуноглобулінів людини мітять НЕ ферментом, а радіоактивним ізотопом (Н3- Тритієм, С14, I125, і т.д.). Результати реакції враховують за допомогою д. І д. Аналізаторів. Студенти знайомляться з обладнанням для РІА.

3. Імунофлюоресцентний метод (ІФМ - демонстрація). Антитіла проти антигенів вірусів і бактерій за рахунок ковалентних зв'язків мітять флюоресцирующим речовиною (найчастіше ізотіоцианатом флюоресцеіна). Готують мікропрепарати на предметних стеклах з матеріалу від хворого (змив з носоглотки, виділення бубон, мазки-відбитки з трупного матеріалу і т. Д.) і обробляють їх флюоресцирующей сироваткою. Якщо в мікропрепаратах є антигени відповідні антитіла флюоресцирующей сироватки, то антитіла з'єднуються з ними і при люмінесцентної мікроскопії утворилися комплекси будуть світитися. Ця модифікація ІФМ називається прямий. При непрямому ІФМ микропрепарат обробляють спочатку звичайною сироваткою проти певного антигену, а потім - антіглобуліновой флюоресцирующей сироваткою. Метод імунофлюоресценції широко застосовується для діагностики різних інфекцій, зокрема, грипу та гострих респіраторних вірусних захворювань. Студенти микроскопируют і замальовують клітини циліндричного епітелію носоглотки людини, уражені вірусом грипу (прямий метод імунофлюоресценції).



Самостійна робота студентів | Г. іммуногістологіческоеультраструктурному дослідження.

Самостійна робота студентів. | Самостійна робота студентів | Вивчення характеру зростання S (E.coli) і R (B. cereus) форм бактерій на щільному і рідкої поживних середовищах (демонстрація). | педіатричні аспекти | Самостійна робота студентів | Самостійна робота студентів | Педіатричні аспекти теми | Освоєння біологічного методу діагностики. | Вивчення деяких факторів патогенності бактерій. | Постановка і облік розгорнутої реакції аглютинації з сироваткою крові хворого при підозрі на бруцельоз (I4 день захворювання). |

© um.co.ua - учбові матеріали та реферати