На головну

Вивчення деяких факторів патогенності бактерій.

Гемолізин. Зроблено посів культури стафілокока на кров'яний МПА. Гемолізин визначають по утворенню зон руйнування еритроцитів навколо колоній у вигляді просвітлення живильного середовища.

плазмокоагулаза. Чистий культура стафілокока внесена в I мл стерильної цитратной плазми крові кролика, розлученою 1: 5. Реакція враховується після інкубації при 370 З протягом 1,2, 4, 18 годин. При наявності у штаму стафілокока плазмокоагулази спостерігається коагуляція плазми з утворенням драглистоподібного згустку.

гиалуронидаза гидролизует гіалуронову кислоту, яка перестає утворювати згусток при додаванні оцтової кислоти. Для визначення цього ферменту в пробірку з гіалуроновою кислотою вносять добову культуру бактерій або фільтрат бульонной культури і інкубують протягом 15 хв при 370 С. Потім додають 2-3 краплі концентрованої оцтової кислоти. У пробах, де міститься гіалуронідаза, освіти згустку не відбувається.

лецитиназа виявляється при посіві золотистого стафілокока на желточно-сольовий агар, що містить лецитин. Навколо колоній, що виділяють фермент, утворюється зона помутніння з перламутровим блиском у вигляді райдужного віночка.

Дермонекротоксін. Кролику під шкіру вводять 0,2 мл двохмільярдний суспензії стафілокока. При наявності у культури дермонекротоксіна на місці ін'єкції утворюється інфільтрат з подальшим некрозом тканини.

Постановка біопроб з метою діагностики ботулізму. Досліджуваний матеріал (фільтрат, отриманий з консервів домашнього приготування - гриби), що послужив причиною отруєння хворого вводять білої миші внутрибрюшинно в обсязі 0,5 мл. Миша гине з явищами паралічів.

3. Розтин і бактеріологічне дослідження трупа білої миші, полеглої в результаті біопроб.Миша заражають per os матеріалом (шматочки м'яса), що послужило причиною харчової токсикоінфекції. Досліджувані шматочки м'яса розтирають у ступці із стерильним піском в невеликій кількості фізіологічного розчину, центрифугують при 3000 об / хв протягом 20 хвилин для осадження грубих шматочків матеріалу і піску. Прозору надосадову рідину набирають шприцом зі спеціальною вигнутою ін'єкційної голкою, кінець якої затуплений за допомогою напилка або надфіля, вводять через рот внутрішньошлунково.

Після огляду трупа тварини прикріплюють до препаровальной дошці, розташовуючи його черевної стінкою вгору; шкіру обробляють дезинфікуючим розчином або спиртом. Щоб уникнути забруднення вмістом кишечника спочатку розкривають шкіру, тупо отсепаровивая її від підшкірної жирової клітковини. Оглядають місце ін'єкції і регіонарні лімфатичні вузли. Пінцетом захоплюють мечоподібний відросток грудини, підтягуючи його вгору. Вирізують грудину разом з прилеглими відрізками ребер і ключиці. Після розтину грудної порожнини розпеченим скальпелем припікають верхівку серця і стерильною пастерівської піпеткою проколюють міокард. При цьому в капіляр піпетки надходить кров із серця. Проводять посів крові на МПА. Потім розкривають черевну порожнину, оглядають внутрішніх органів, виробляють посіви-відбитки з органів на сектора чашки Петрі з МПА. З цією метою припікають поверхню органу розпеченим скальпелем, відрізають шматочок і роблять посів-відбиток на пластинчастий МПА. Паралельно готують МАЕК-відбитки з печінки, нирок, легенів і селезінки, для чого шматочком органу торкаються поверхнею розрізу до предметного скла. Мазки фіксують у полум'ї спиртівки, фарбують за Грамом, мікроскопують; посіви поміщають в термостат.

Під час розтину необхідно стежити за тим, щоб заразний матеріал не потрапляв на стіл. Забороняється класти на стіл інструменти, що застосовуються при розтині трупа. Після розтину робоче місце прибирають і дезінфікують. Труп тварини поміщають в дезінфікуючий розчин. Хід дослідження оформляється протоколом за таким зразком:

Протокол № 3

Бактеріологічне дослідження трупа білої миші, полеглої в результаті біопроб.

 день дослідження  хід дослідження  результат дослідження

 



Освоєння біологічного методу діагностики. | Постановка і облік розгорнутої реакції аглютинації з сироваткою крові хворого при підозрі на бруцельоз (I4 день захворювання).

Знайомство з методами асептики, антисептики, дезінфекції та стерилізації. | Самостійна робота студентів | Самостійна робота студентів | Самостійна робота студентів. | Самостійна робота студентів | Вивчення характеру зростання S (E.coli) і R (B. cereus) форм бактерій на щільному і рідкої поживних середовищах (демонстрація). | педіатричні аспекти | Самостійна робота студентів | Самостійна робота студентів | Педіатричні аспекти теми |

© um.co.ua - учбові матеріали та реферати