Головна

Застосування в наукових дослідженнях

  1. II. Застосування аналітичної техніки до дослідження психічних утворень
  2. IV. Наукові картини світу. Етапи розвитку та формування наукових картин світу. Природничо-наукова картина світу
  3. Part 12. Область моїх наукових інтересів
  4. Апробація результатів дослідження та їх практичне застосування
  5. Балансової ув'язки із застосуванням способу різниць
  6. Безпаперове подання інформації, застосування електронно-цифрового підпису
  7. У психолого-педагогічних дослідженнях.

нокаут гена. Для вивчення функції того чи іншого гена може бути застосований нокаут гена (gene knockout). Так називається техніка видалення одного або більшої кількості генів, що дозволяє досліджувати наслідки подібної мутації. Для нокауту синтезують такий же ген або його фрагмент, змінений так, щоб продукт гена втратив свою функцію. Для отримання нокаутних мишей отриману генно-інженерну конструкцію вводять в ембріональні стовбурові клітини, де конструкція піддається соматичної рекомбінації і заміщає нормальний ген, а змінені клітини імплантують в бластоцисту сурогатної матері. У плодової мушки дрозофіли мутації ініціюють в великій популяції, в якій потім шукають потомство з потрібною мутацією. Подібним способом отримують нокаут у рослин і мікроорганізмів.

штучна експресія. Логічним доповненням нокауту є штучна експресія, тобто додавання в організм гена, якого у нього раніше не було. Цей спосіб генної інженерії також можна використовувати для дослідження функції генів. По суті процес введення додаткових генів такий же, як і при нокауті, але існуючі гени не заміняють і не пошкоджуються.

Схема будови зеленого флуоресцентного білка

Візуалізація продуктів генів. Використовується, коли завданням є вивчення локалізації продукту гена. Одним із способів мічення є заміщення нормального гена на злитий з репортёрним елементом, наприклад, з геном зеленого флуоресцентного білка (GFP). Цей білок, флуоресціюючий в блакитному світлі, використовується для візуалізації продукту генної модифікації. Хоча така техніка зручна і корисна, її побічними наслідками може бути часткова або повна втрата функції досліджуваного білка. Більш витонченим, хоча і не настільки зручним методом є додавання до досліджуваного білку не настільки великих олігопептидів, які можуть бути виявлені за допомогою специфічних антитіл.

Дослідження механізму експресії. У таких експериментах завданням є вивчення умов експресії гена. Особливості експресії залежать перш за все від невеликої ділянки ДНК, розташованого перед кодує областю, який називається промотор і служить для зв'язування факторів транскрипції. Ця ділянка вводять в організм, поставивши після нього замість власного гена репортерний, наприклад, GFP або ферменту, що каталізує легко виявляємо реакцію. Крім того, що функціонування промотора в тих чи інших тканинах в той чи інший момент стає добре помітним, такі експерименти дозволяють досліджувати структуру промотора, прибираючи або додаючи до нього фрагменти ДНК, а також штучно посилювати його функції.



Історія розвитку і досягнутий рівень технології | Генна інженерія людини
© um.co.ua - учбові матеріали та реферати