На головну

Робота № 5. Кількісне визначення активності пероксидази крові за методом Н. І. Сімакова.

  1. C) Кілька років працював Білоруський пересувний театр під керівництвом Владислава Голубка
  2. E1. Принцип активності користувача
  3. I. 4. Які типи хвиль існують в природі, техніці? Які хвилі називаються пружними? Дайте визначення поздовжніх і поперечних пружних хвиль.
  4. I. Визначення рівнянь лінійної регресії
  5. I. ПІДГОТОВЧА РОБОТА
  6. I. ПОСТАНОВКА ПРОБЛЕМИ І ВИЗНАЧЕННЯ МОВНИХ ЖАНРІВ 1 сторінка
  7. I. ПОСТАНОВКА ПРОБЛЕМИ І ВИЗНАЧЕННЯ МОВНИХ ЖАНРІВ 2 сторінка

Принцип методу.Метод заснований на окисленні индигокармина киснем, що виділяється при розкладанні перекису водню під впливом пероксидази. Активність ферменту вимірюється часом, необхідним для окислення индигокармина, який змінює забарвлення від синьо-зеленого в жовто-рожевий колір. Чим менше час окислення, тим вище активність ферменту.

Хід роботи.У пробірку налити 2 мл 0,1 М ацетатного буфера рН 4,7, додати 3 мл розведеної в 1000 разів крові (див. Роботу 2), 2 мл дистильованої води і 1 мл 0,001% розчину индигокармина. Вміст пробірки ретельно перемішати і швидко внести в неї 2 мл 0,2% розчину Н2О2. У момент внесення Н2О2 засікти за секундоміром час і зафіксувати час переходу синьо-зеленого забарвлення в жовто-рожеву.

Розрахунок.Пероксидазного дію крові пов'язано з кількістю гемоглобіну, кількість якого у різних людей відрізняється, тому визначається індекс пероксидазною реакції. Це відношення часу окислення индигокармина, до процентним вмістом гемоглобіну в крові, помножене на 100%.

Приблизний розрахунок. Припустимо, що перехід фарбування рідини стався за 8 секунд, а кількість гемоглобіну в досліджуваній крові становить 80% (160 г / л гемоглобіну прийнято приймати за 100%); отже, індекс пероксидазною активності дорівнюватиме:

8 сек ? 100% = 10

 80%

В нормі пероксидазна активність крові коливається від 30 до 50 секунд.



Робота №4. Кількісне визначення активності каталази крові методом А. Н. Баха і С. Р. Зубкової. | Еталони відповідей на ситуаційні задачі

Приклади контролю вихідного рівня знань | Робота № 1. Кількісне визначення білірубіну в сироватці крові за методом Іендрашека. | Робота № 2. Визначення лужного резерву крові титрометричним методом | Еталони відповідей на ситуаційні задачі | Заняття № 2. Біохімія печінки. Механізми знешкодження токсичних речовин. | Методичні вказівки до самопідготовки | Приклади контролю вихідного рівня знань | Робота № 1. Проби коллоідоустойчівості білків сироватки крові. | Робота № 2. Кількісне визначення активності альдолази в сироватці крові (метод Брунса в модифікації Е. Н. Валуйськ і В. І. Товарницького). | Робота № 3. Визначення активності фруктозо-1-фосфаталь-долази. |

© um.co.ua - учбові матеріали та реферати