На головну

Сучасні методи визначення кількості гормонів

  1. A. Для скорочення кількості арифметичних операцій при обчисленні функцій.
  2. C - матриця (за формою нагадує куб) застосовується для визначення взаємозв'язку елементів трьох списків одночасно.
  3. D. Сучасні уявлення про походження сутності
  4. I. Методи суворо регламентованого вправи.
  5. II Общепедагогические методи.
  6. II. 17. Поясніть фізичну сутність визначення швидкості звуку методом резонансу.
  7. II. 7. Поясніть метод визначення довжини світлової хвилі в лабораторній роботі.

До 60-х років минулого століття про активність більшості гормонів, особливо білково-пептидної природи судили шляхом використання біологічних методів - по вираженості того чи іншого ефекту після введення гормону. У 1960р. R. Yalow (Р. Ялоу) і S. Berson (С. Берсон) вперше запропонували радіоімунологічний аналіз (РІА) для визначення інсуліну в крові людини. Відкриття даного принципу поклало початок бурхливому розвитку розробок методів кількісного визначення гормонів в аналізованих пробах.

До основних переваг радиоиммунологического аналізу відносяться: висока чутливість - здатність визначати мінімальні кількості речовини, приблизно рівні 10-14 - 10-15моль / л, специфічність, надійність, точність і ін.

В основі РІА лежить принцип використання радіоактивності для детекції специфічних комплексів (антиген-антитіло), що утворюються в результаті імунологічної реакції з досліджуваним речовиною. При цьому відбувається конкурентна взаємодія двох антигенів: немічених, що представляє собою визначається гормон, і міченого аналога цього гормону з включеною радіоактивною міткою. Зв'язує агент - відповідне тіло, вступає в рівноправна взаємодія як з шуканим гормоном, так і з його міченим аналогом. Зв'язує агент має обмежену, строго заданої ємністю, і він не може утворювати комплекс відразу з усією кількістю міченого і немічених гормонів. Згідно із законом діючих мас відбувається зв'язування гормонів в кількостях, пропорційних їх вихідним концентраціям:

 АГ* АГ* - Ат

 Ат

 АГ АГ - Ат

АГ* - Гормон-антиген з радіоміткою

АГ - гормон-антиген шуканий, або визначається

Ат - сполучний агент (антитіло).

При цьому, чим вищий вміст шуканого (визначається) гормону в пробі, тим менша частина його радіоактивно міченого аналога зв'яжеться з антитілом. Отже, знаючи кількість сполучного агента і міченого гормону, концентрації яких є величиною заданою, можна розрахувати концентрацію шуканого гормону.

В даний час розроблені також такі види радиоиммунологического аналізу як іммунорадіометріческій, радіорецепторний.

Однак РІА має ряд недоліків, в тому числі метод вимагає спеціального оснащення лабораторій для роботи з радіоактивним матеріалом. Тому на початку 1970-х років було запропоновано в якості нерадіоактивного індикатора ферментна мітка, коли гормон (антиген) або сполучний агент (антитіло) хімічно міцно з'єднаний з ферментом. При цьому ферментативна активність згодом після відповідної обробки пропорційна кількості визначається гормону. В останні роки для визначення гормонів використовується імунологічна реакція, де в якості субстрату приєднуються люмінофори - речовини, що світяться в ультрафіолеті (метод імунохемілюмінесцентного аналізу). Рівень світіння вимірюється на спеціальних приладах люмінометр.

Для успішного засвоєння теми виконайте наступні завдання:

 № п / п  завдання  Методичні вказівки до виконання завдання
 1.  Вивчіть гормони гіпоталамуса і гіпофіза.  1. Поясніть, чому гіпоталамус виконує роль вегетативного центру нервово-рефлекторної та ендокринної регуляції обміну веществ.2. Охарактеризуйте структуру і роль гормонів гіпоталамуса: релізинг гормонів, статинів і нейрогормонів (вазопресину, оксітоціта) 3. Чому вазопресин отримав назву «антидіуретичний гормон»? Які причини і прояви нецукрового діабету? 4. Розберіть структуру і біологічну роль соматотропіну, фоллікустімулірующего гормону, лютеїнізуючого гормону, пролактіта, тиротропина, кортікотропіна.5. Охарактеризуйте основи автономної саморегуляції систем - гіпоталамо-гіпофізарно-гонадної, гіпоталамо-гіпофізарно-тиреоїдної та гіпоталамо-гіпофізарно-кортікоідние осі.
 2.  Вивчіть йодовані гормони щитовидної залози.  1. Напишіть основні етапи біосинтезу йодованих гормонів щитовидної желези.2. Відзначте особливості транспорту в крові і взаємодії з рецепторами тироксину і трійодтіроніна.3. Розгляньте основні фізіологічні ефекти тиреоїдних гормонів, вплив на енергетичний обмін, обмін вуглеводів, ліпідів і белков.4. Охарактеризуйте захворювання, пов'язані з гіпер- і гіпопродукціей тироксину і трийодтироніну.
 3.  Вивчіть пептидні гормони, що регулюють кальцій-фосфорний обмін.  1. Опишіть структуру і метаболічні функції в кістковій тканині, нирках і тонкому кишечнику кальцитонина щитовидної желези.2. Опишіть структуру і вплив на кальцій-фосфорний обмін паратгормона.
 4.  Вивчіть інсулін підшлункової залози.  1. Охарактеризуйте особливості структури і біосинтезу інсуліну. Перерахуйте стимули, що регулюють інкрецію інсуліна.2. Зверніть увагу на рецептор інсуліну, що володіє каталітичної актівностью.3. Відзначте вплив інсуліну на ключові регуляторні ферменти гліколізу, глікогенезу, апотоміческого окислення, циклу трикарбонових кислот, липогенеза, трансляції белка.4. Випишіть схему молекулярного механізму внутрішньоклітинної передачі гормонального сигналу інсуліну.
 5.  Вивчіть порушення обміну речовин при цукровому діабеті.  1. Перелічіть форми цукрового діабету. Чим вони відрізняються? 2. Випишіть основні біохімічні прояви цукрового діабету: а) б) в) і т.д.3. Поясніть, чому при цукровому діабеті порушується використання глюкози крові. Вкажіть ферментативні блоки гліколізу, глікогенезу, пентозофосфатного окісленія.4. Дайте відповідь, чому при цукровому діабеті знижується інтенсивність циклу трикарбонових кислот, посилюється глюконеогенез.5. Напишіть реакцію гликозилирования білків при цукровому діабете.6. Вивчіть причини, механізми та наслідки посилення при цукровому діабеті ліполізу і ?-окислення жирних кіслот.7. Які порушення використання ацетил-КоА при цукровому діабеті? Поясніть причину кетонемії і кетонурии при цукровому діабете.8. Поясніть, чому недостатність інсуліну призводить до порушення біосинтезу нуклеїнових кислот і білка, до посилення протеолізу тканинних білків і катаболізму амінокіслот.9. Дайте визначення поняттям «цукрова крива», нирковий «цукровий поріг».
 6.  Вивчіть структуру і вплив на обмін речовин глюкогона.  1. Опишіть структуру і метаболічну вплив глюкогона на обмін вуглеводів і нейтрального жіра.2. Уявіть схему внутрішньоклітинного механізму передачі гормонального сигналу глюкогона на обмін глікогену і нейтрального жиру.
 7.  Вивчіть гормони мозкового шару надниркових залоз.  1. Напишіть хімізм реакцій біосинтезу норадреналіну і адреналіну з тірозіна.2. Перерахуйте фізіологічні ефекти адреналіну і норадреналіну: а) 1) б) 2) в) і ін. 3) і т.д.3. Перерахуйте біохімічні ефекти адреналіну в печінці, м'язової тканини і жирової ткані.4. Уявіть схему аденілатціклазного шляху мобілізації глікогену і нейтрального жиру при взаємодії адреналіну з ?-рецепторами.
 8.  Вивчіть пептидні гормони, що регулюють кальцій-фосфорний обмін.  3. Опишіть структуру і метаболічні функції в кістковій тканині, нирках і тонкому кишечнику кальцитонина щитовидної желези.4. Опишіть структуру і вплив на кальцій-фосфорний обмін паратгормона.

Підготуйте до заняття протокол лабораторних робіт, виписавши коротко принцип методу, техніку проведення якісних реакцій і кількісної оцінки гормону на практичному занятті, залишаючи місце для розрахунків і резюме.

 



Заняття № 2. Гормони білкової природи. | Приклади тестів контролю вихідного рівня знань

У сечі. | Робота № 3. Визначення вмісту гемоглобіну в крові ціанметгемоглобіновим методом по Драбкін. | Еталони відповідей на ситуаційні задачі | Методичні вказівки до самопідготовки | Приклади тестових завдань | Рекомендовані теми реферативних повідомлень | Заняття № 1. Інтеграція обміну речовин і його регуляція. Загальні властивості гормонів (семінар). | Методичні вказівки до самопідготовки | Приклади тестів контролю вихідного рівня знань | Еталони відповідей на ситуаційні задачі |

© um.co.ua - учбові матеріали та реферати