Головна

Вірусології та імунології | Основи класифікації та морфології мікроорганізмів | ультраструктура бактерії | Глава 2 Фізіологія мікроорганізмів | харчування бактерій | дихання бактерій | Ферментативна активність бактерій | Зростання і розмноження мікроорганізмів | Пігментообразованія у бактерій | Живильні середовища і мікробіологічне дослідження |

методи посівів

  1. I. Методи суворо регламентованого вправи.
  2. II Общепедагогические методи.
  3. II. Методи виховання фізичних якостей.
  4. II. МЕТОДИ ЧАСТКОВО регламентовані вправи
  5. II. МЕТОДИ, ПІДХОДИ І ПРОЦЕДУРИ ДІАГНОСТИКИ І ЛІКУВАННЯ
  6. III.2. Види, форми і методи педагогічної діагностики
  7. lt; 3 Методи регіонального маркетингу

Важливим етапом бактеріологічного дослідження ся посів. Залежно від мети дослідження, харак ра посівного матеріалу і середовища використовують різні методи посіву. Всі вони включають обов'язкову мету: захистити пс сівши від сторонніх мікробів. Тому працювати слід швидко, але без різких рухів, що підсилюють коливатися * повітря. Під час посівів не можна розмовляти. ПосевМ краще робити в боксі (при роботі з заразним матеріалол необхідно виконувати правила особистої безпеки).

Етапи виділення чистої культури:

1-й день - отримання ізольованих колоній. Кашпо досліджуваного матеріалу петлею, піпеткою або скляною паличкою наносять на поверхню агару в чашці Петрі. Шпа-i телем втирають матеріал в поверхню середовища; НЕ прожиг і не перевертаючи шпателя, проводять посів на 2-й, а тим на 3-й чашці. При такому посіві на 1-ю чашку доводиться багато матеріалу і відповідно багато мікробів, на 2-ю менше і на 3-ю ще менше.

Можна отримати ізольовані колонії при посіві петлею. Для цього досліджуваний матеріал емульгують в бульйоні або фізіологічному розчині натрію хлориду.

2-й день - вивчають зростання мікробів на чашках. У 1-й чашці зазвичай буває суцільний ріст - виділити ізольовану колонію не вдасться. На поверхні агару у 2-й і 3-й чашці виростають ізольовані колонії. Їх вивчають неозброєним оком, за допомогою лупи, при малому збільшенні мікроскопа і іноді в стереоскопічному мікроскопі. Потрібну колонію відзначають з боку дна чашки і пересівають на скошений агар. Посіви ставлять в термостат. (Пересівати можна тільки ізольовані колонії.)

3-й день - вивчають характер росту на скошеному агарі. Роблять мазок, фарбують його і, переконавшись в тому, що культура чиста, приступають до її вивчення. На цьому виділення чистої культури закінчується. Виділена з певного джерела і вивчена культура називається «штамом».

При виділенні чистої культури з крові (гемокуль-тури) її попередньо «підрощують» в рідкому середовищі: 10-15 мл стерильно взятої крові засівають в 100-150 мл рідкого середовища. Так надходять тому, що в крові зазвичай мало мікробів. Співвідношення засеваемой крові і живильного середовища 1: 10 не випадково - так досягається розведення крові (нерозведена кров згубно діє на мікроорганізми). Колби з посівом ставлять в термостат. Через добу (іноді через більший час, в залежності від виділеної культури) з вмісту колб роблять висіву на чашки для отримання ізольованих колоній. При необхідності повторюють висіву з інтервалом в 2-3 дня.

При виділенні чистої культури з сечі, промивних вод шлунка та інших рідин їх попередньо центрифугують в асептичних умовах і засівають осад. Подальше виділення чистої культури проводять звичайним способом.

Для виділення чистої культури широко застосовують елективні середовища. У ряді методів для отримання чистих культур використовують біологічні особливості виделяемог мікроба. Наприклад, при виділенні спороутворюючих бак- терій посіви 10 хв прогрівають при 80 ° С, вбиваючи цим ве гетатівние форми. При виділенні збудника туберкул-j за, стійкого до кислот і лугів, за допомогою цих ве-1 речовин посівний матеріал звільняють від супутньої! флори. Для виділення пневмокока і палички чуми дослі-1 дуємо матеріал вводять білим мишам - в їх організмі високочутливому до даних збудників, ці мікро-] б розмножуються швидше інших.

У науково-дослідній роботі, особливо при генерації; тичних дослідженнях, необхідно отримувати культури за-1 невідомо з однієї клітини. Така культура називається «клон»] Для її отримання найчастіше користуються мікроманіпуля- ^ тором - приладом, обладнаним інструментами (голками] пипетками) мікроскопічних розмірів. За допомогою дер-j жателя під контролем мікроскопа їх вводять в препарат «B сячая крапля», витягують потрібну клітину (одну) і переносять її в живильне середовище.

Вивчення виділених культур

Вивчення морфології, рухливості, тинкторіальними властивостей, характеру зростання на середовищах (культуральні властивості) ;! ферментативної активності і ряду інших особливостей ви! поділеної мікроба дозволяє встановити його таксономічес | дещо становище, т. е. класифікувати мікроорганізм: оп | ределить його рід, вид, тип, підтип, різновид. Це на називається «ідентифікацією». Ідентифікація мікроорганіз | мов дуже важлива при діагностиці інфекцій, встановлена ??джерел і шляхів її передачі і в ряді інших науково-л тичних досліджень.



Практична частина | культуральні властивості
© um.co.ua - учбові матеріали та реферати