Головна

Сучасні методи дослідження біологічно активних речовин | Спектральні методи аналізу | переваги методу | Основний принцип хроматографічного розділення. | Пристрій рідинного хроматографа | Методики виконання лабораторних робіт | Метод РН диференціальної спектрофотометрії визначення масової частки суми антоцианінів в сокової продукції. | Спектрофотометрическое визначення кількісного вмісту аскорбінової кислоти (вітаміну С) в напоях. | Визначення вмісту вітамінів В1, В2 методом ВЕРХ у премікси. | Основи ионообменного методу |

Детектори для ВЕРХ

  1. А) Нейрони-детектори
  2. детектори радіоактивності

Детектори для ВЕРХ служать для фіксування змін будь-яких властивостей розчинника, що виходить з колонки. Як правило ці зміни пов'язані з наявністю в розчиннику аналізованих речовин. Це може бути зміна оптичних властивостей елюента (в ІК, УФ або видимій області), його показника заломлення, здатності флюоресцировать, електропровідності, здатності окислюватися або відновлюватися, діелектричної проникності і т. Д. Найчастіше застосовують такі типи детекторів.

Детектори зі змінною довжиною хвилі являють собою спектрофотометри, що працюють в ультрафіолетовому та видимому діапазоні довжин хвиль. Детектори мають чутливість 5 • 10-10 г / см 3 і лінійний діапазон 105 Все спектрофотометрические детектори мають проточні комірки з малим внутрішнім об'ємом (зазвичай 8 мм3 ) І довжиною оптичного шляху 10 мм, що дозволяє здійснювати безперервний моніторинг на виході з колонки.

Флуоресцентний детектор надзвичайно зручно використовувати в ВЕРХ, оскільки він набагато більш чутливий (10-12 г / см3 ), Ніж детектор, що працює в УФ діапазоні, проте його лінійний діапазон трохи вже (104 ). На жаль, область застосування таких детекторів обмежена порівняно невеликим числом флуоресціюючих речовин. Проведення попередньої дериватизації зразків може розширити межі застосування методу.

Електрохімічні детектори використовують для аналізу електроактивних речовин і є досить чутливими. Існують два типи таких детекторів з подібними принципами дії - амперометричні і кулонометрические. У проточній осередку розташовані два електроди: протівоелектрод (Ag / AgCI або каломельний) і робочий електрод. На протівоелектрод подається постійний потенціал такої величини, що при проходженні речовин через осередок вони окислюються або відновлюються на його поверхні, в результаті чого між електродами виникає електричний струм. Величина цього струму реєструється і записується у вигляді хроматограми.

Більша перевага віддається амперометричним детекторів, оскільки вони мають більшу чутливість (10-12 г / см3 проти 10-8 г / см3 ) І більш протяжним лінійним діапазоном (105 проти 104). Для відновлювальних реакцій в якості робочого електрода використовується ртутний електрод, а для окислювальних реакцій -електрод з вуглецю або вуглецевих компонентів.

До здатним окислюватися речовин відносяться вуглеводні, аміни, аміди, феноли, ді і триазин, фенотріазіни, катехоламіни і хіноліни.

Поділяються детектори на селективні і універсальні.

Селективні детектори фіксують елюювання цікавлять дослідника речовин, які мають специфічні властивості, на тлі багатьох інших компонентів, цими властивостями що не володіють. Ці детектори (флуоресцентний, електрохімічний і ін.) Широко застосовуються для аналізу слідів лікарських препаратів в біологічних зразках, біогенних амінів і микропримесей ,.

Універсальні детектори реагують на елюювання будь-яких речовин незалежно від того, мають вони якимись особливими властивостями чи ні. Такі детектори широко застосовуються в нафтохімії, органічної хімії, хімічної, медичної фармацевтичної, промисловості, біологічних науках.

Прикладом універсального детектора може служити рефрактометричний детектор. Диференціальний рефрактометр безперервно реєструє зміна показника заломлення елюата (диференціальне вимір показника заломлення чистого розчинника і розчину аналізованого речовини в цьому розчиннику) на виході з колонки.

Головним достоїнством детектора є те, що при виборі відповідного розчинника він може детектувати будь-які речовини. До інших достоїнств рефрактометра відносяться можливість роботи з будь-якими розчинниками в широкому інтервалі швидкості потоку, невисокі вимоги до чистоти рухомої фази, надійність і зручність в експлуатації. Деякі моделі детекторів можуть працювати при температурі до 150 ° С, що є виключно важливим для ексклюзіонной хроматографії ряду синтетичних полімерів. Тому він займає друге місце по частоті використання (після УФ - детекторів).

Чутливість цих детекторів до змін температури для різних розчинників становить від 5 • 10-4 до 5 • 10-5 одиниць показника заломлення (е. п. п.) на 1 ° С, а до змін тиску - (1-5) • 10 -4 е. п. п. / МПа.

 



Інжектори | колонки
© um.co.ua - учбові матеріали та реферати