Головна

Прилади для кількісного обліку ПЛР в режимі реального часу

  1. II. Розміщення прийнятих замовлень в часі і просторі. 1 сторінка
  2. II. Розміщення прийнятих замовлень в часі і просторі. 10 сторінка
  3. II. Розміщення прийнятих замовлень в часі і просторі. 11 сторінка
  4. II. Розміщення прийнятих замовлень в часі і просторі. 12 сторінка
  5. II. Розміщення прийнятих замовлень в часі і просторі. 13 сторінка
  6. II. Розміщення прийнятих замовлень в часі і просторі. 14 сторінка
  7. II. Розміщення прийнятих замовлень в часі і просторі. 15 сторінка

- (REAL-TIME PCR)

Прилади для оцінки ПЛР в режимі реального часу являють собою своєрідний гібрид ампліфікатора і флюоріметре і дозволяють оцінювати динаміку ПЛР прямо в закритих пробірках в міру накопичення продукту ампліфікації і проводити кількісний ПЛР-аналіз. Специфічність сигналу при ПЛР в реальному часі обумовлена ??застосуванням спеціальних ДНК-зондів з флюоресцентной міткою. В процесі ПЛР у міру синтезу нових і нових копій шуканого ділянки гена відбуваються специфічне зв'язування цієї міченої ланцюжка нуклеотидів і її руйнування з виходом барвника в навколишнє середовище. У міру протікання ПЛР світлочутливі елементи знімають показники з кожної з пробірок і вводять ці дані в пам'ять комп'ютера. При цьому будується динамічна крива накопичення ПЛР-продукту за окремими пробами.

Обсяги аналізованих проб, час аналізу і температура вимірювань відповідають таким для звичайної ПЛР. Проте в цьому режимі не потрібен додатковий час на процедури, пов'язані з електрофорезом, так як криві накопичення продуктів реакції доступні відразу після закінчення real-time PCR. Калібрування залежить від типу наявного приладу. Вона потрібна для оптимізації параметрів оптичного блоку і вирівнювання показників по окремим лунках, здійснюється з тими флюорохромами, якими позначені застосовуються ДНК-зонди.

Кількісна оцінка ДНК або РНК патогенного мікроорганізму в клінічних зразках буває виключно важлива для прогнозу захворювання і контролю терапії. Ця технологія активно впроваджується в російські клініко-діагностичні лабораторії.

Крім можливості кількісного обліку результатів реакції, до безперечних достоїнств real-timePCR слід віднести високу технологічність дослідження і зниження ймовірності забруднення приміщень лабораторії продуктами ампліфікації



Попередня   101   102   103   104   105   106   107   108   109   110   111   112   113   114   115   116   Наступна

Регуляція вмісту глюкози в крові | ДОСЛІДЖЕННЯ ВУГЛЕВОДНОГО ОБМІНУ | гліколізірованного гемоглобін | Клініко-діагностичне значення визначення вмісту сіалових кислот в сироватці крові | ДОСЛІДЖЕННЯ ОБМІНУ ЛІПІДІВ | ліпідного обмін | Аналіз клінічної ситуації. Навчальна задача 1. | Аналіз клінічної ситуації. Навчальна задача 2. | ГЛАВА 8. молекулярно-ГЕНЕТИЧНІ ДОСЛІДЖЕННЯ | ПЛР з детекцією результатів в режимі реального часу |

© um.co.ua - учбові матеріали та реферати