Головна |
Подрібнений в ступці матеріал, залитий розчином хлориду натрію, залишають на 1 годину для екстрагування токсину. Отриманий екстракт фільтрують через ватно - марлевий фільтр. Фільтрат ділять на дві порції. До однієї з порцій додають протиправцевий антитоксин і залишають на 1 годину для нейтралізації токсину.
Постановка досвіду (реакція нейтралізації на мишах). У досвід беруть дві пари мишей. Першій парі внутрішньом'язово в стегно задньої лапки вводять по 0,5 мл екстракту. Двом іншим мишам вводять ту ж кількість екстракту з антитоксической протиправцевої сироваткою. Тварин поміщають в скляну банку і ведуть за ними спостереження.
Другу частину емульсії засівають на поживні середовища у флаконах і на чашки Петрі з живильним агаром (для отримання окремих колоній). Посіви інкубують в анаеробних умовах при температурі 35- 370С.
Якщо тварини не загинули, продовжують за ними спостереження. Ознаки правця у мишей: скуйовджена шерсть, ригідність кінцівок і хвоста («хвіст трубою»), параліч лапки, в якому запроваджено токсин. Тварини гинуть в характерній позі: підібгавши передні лапки і витягнувши задні.
Після загибелі тварини виробляють мікроскопічне і бактеріологічне дослідження тканин з органів. У контрольних мишей, які отримали токсин одночасно з антитоксином, захворювання на правець не виникає. При негативному результаті біологічної проби вивчають посіви. Підозрілі колонії пересівають для виділення чистої культури на середу Кітт - Тароцці.
Вивчають культуральні властивості виділених мікроорганізмів. Роблять мазки і микроскопируют їх. Отриману культуру відчувають на наявність правцевого токсину в біологічній пробі (по тій же схемі).
4. Проба на чутливість до антибіотиків на середовищі Цейсслера і інкубують при температурі 370З 8 - 24 години в анаеробних умовах.
Vетап
1. Облік всіх тестів.
2. Видають остаточну відповідь.
Висновок: «Виділено Clostridium tetani чутливі до еритроміцину і тетрацикліну, проміжні до гентаміцину, стійкі до пеніциліну і стрептоміцину».
клостридії правця | Механізм зараження, патогенез, клінічні форми газової анаеробної інфекції, імунітет. Профілактика. | Методи мікробіологічної діагностики. | Алгоритм проведення біопроби (реакція нейтралізації на мишах) при діагностиці газової гангрени. Мета постановки цієї реакції для визначення виду збудника. |